异体富血小板血浆免疫原性的小型猪动物实验研究

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目的评价异体富血小板血浆(PRP)在小型猪体内产生的免疫原性反应。方法无菌条件下经颈动脉取1只雄性巴马小型猪全血,第1次以1 000×g力离心15 min分离红细胞,第2次以3 000×g力离心10 min获取PRP;剩余9只雄性巴马小型猪,抽签法选取3只,取其耳缘静脉血各1. 0 m L。后9只小型猪双侧股部分别注射激活的异体PRP 0. 5 m L,按抽签法分为1、2、4周组,每组3只,于异体PRP注射后1、2、4周分别取对应组各小型猪耳缘静脉血1. 0 m L,之后处死该小型猪,取注射部位组织。流式细胞仪检测比较CD4~+/CD8~+T淋巴细胞亚群比例,生物显微镜下观察组织形态学变化及免疫组织化学分析局部组织免疫原性反应。对数据行单因素方差分析和Dunnett-t检验。结果小型猪肌肉注射异体PRP前,CD4~+/CD8~+T淋巴细胞亚群比例为0. 75±0. 04,异体PRP注射后1、2、4周CD4~+/CD8~+T淋巴细胞亚群比例分别为0. 96±0. 02、0. 85±0. 02、0. 79±0. 02,比较差异有统计学意义(F=37. 970,P <0. 001)。异体PRP注射后1、2周CD4~+/CD8~+T淋巴细胞亚群比例与参照组比较,差异均有统计学意义(P <0. 001、=0. 004);异体PRP注射后4周CD4~+/CD8~+T淋巴细胞亚群比例与参照组比较,差异无统计学意义(P=0. 201)。病理检查可见,异体PRP注射部位的局部组织于注射后1周有轻微炎性细胞浸润和白细胞介素-2(IL-2)的表达,注射后2、4周炎性细胞浸润逐渐消失,IL-2表达转为阴性。结论异体PRP注射仅在小型猪体内产生轻微的局部和全身免疫原性反应,且在注射后4周该免疫原性反应基本消失。
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