【摘 要】
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摘要：目的采用双水相萃取法提取高产菌株SD发酵液中碱性蛋白酶，考察相关条件对萃取的影响，并对该法提取发酵液中碱性蛋白酶的工艺条件进行探索。方法碱性蛋白酶高产菌株SD8液體发酵培养，采用高聚物聚乙二醇（PEG）-硫酸铵体系进行双水相萃取。整个过程包括单因素试验、正交试验和酶的濃缩提纯试验三个部分，考察了PEG分子量，PEG浓度，硫酸铵浓度以及pH对萃取的影响；进一步采用正交试验，探索最佳萃取条件及不
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摘要：目的采用双水相萃取法提取高产菌株SD发酵液中碱性蛋白酶，考察相关条件对萃取的影响，并对该法提取发酵液中碱性蛋白酶的工艺条件进行探索。方法碱性蛋白酶高产菌株SD8液體发酵培养，采用高聚物聚乙二醇（PEG）-硫酸铵体系进行双水相萃取。整个过程包括单因素试验、正交试验和酶的濃缩提纯试验三个部分，考察了PEG分子量，PEG浓度，硫酸铵浓度以及pH对萃取的影响；进一步采用正交试验，探索最佳萃取条件及不同因素之间的相互影响；对获得的提取物采用超滤的手段进行浓缩和纯化，去除PEG并测定浓缩液的酶活及回收率。结论单因素实验确定选择PEG1500，其他因素以PEG浓度2096，硫酸铵10%饱和度，pH 7 5，碱性蛋白酶的提取效果较好；正交试验结果表明以上因素的影响主次顺序为体系pH值、PEG浓度和硫酸铵浓度；纯化实验显示，超滤去除聚乙二醇的方法可行，纯化效果较好。本试验的成果对于碱性蛋白酶的生产以及科学研究有着一定的借鉴意义。
关键词：双水相萃取法；碱性蛋白酶；分配系数；活性回收率
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