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为便于下游中试规模生产，采用温度敏感型启动子ＰＲＰＬ构建ｒｈＴＮＦα工程菌，并对影响工程菌发酵培养在表达的因素进行了初步研究。结果显示，采用ＲＴＢ培养基，５０℃热水快速升温，诱导培养４￣４．５ｈ。湿菌体收获率和表达量均达到较高水平；５０Ｌ发酵罐连续发酵３批，１４０００ｒ／ｍｉｎ连续离心，菌体收获率湿重达１６．９ｇ／Ｌ培养物，ｒｈＴＮＦα表达量占菌体总蛋白的１０．５％，活性达１．３５×１０＾７Ｕ／ｍ