【摘 要】
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因胸膜肺炎放线杆菌的致病性主要是由毒素决定的,故参照猪胸膜肺炎放线杆血清2型菌株的序列(GenBank L12145)设计了一对特异性引物,用PCR的方法扩增apxⅢA基因并得到了长3 46
【机 构】
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华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒室
【基金项目】
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国家自然科学基金，湖北省科技攻关项目
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因胸膜肺炎放线杆菌的致病性主要是由毒素决定的,故参照猪胸膜肺炎放线杆血清2型菌株的序列(GenBank L12145)设计了一对特异性引物,用PCR的方法扩增apxⅢA基因并得到了长3 466bp的片段,然后将其克隆到pMD-18T中,经酶切鉴定和序列分析表明克隆是成功的;再将apxⅢA插入到原核表达载体pET-28b后,转化BL21(DE3),在IPTG诱导下获得高效表达,经Western blotting检测证实表达产物有活性.以表达产物包被ELISA板,建立了特异、敏感的ELISA诊断方法.
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