【摘 要】
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目的 通过Fas配体 (FasL) Fas途径清除异体骨髓移植 (allo BMT)物中针对受体主要组织相容复合物 (MHC)的淋巴细胞 ,从而抑制受体发生移植物抗宿主病 (GVHD)。方法 实验组
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病学研究所; 武汉大学人民医院小儿科; 华中科技大学同济医学院免疫学研究所 430022.武汉; 430022.武汉;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目 ( 39770 76 7)
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目的 通过Fas配体 (FasL) Fas途径清除异体骨髓移植 (allo BMT)物中针对受体主要组织相容复合物 (MHC)的淋巴细胞 ,从而抑制受体发生移植物抗宿主病 (GVHD)。方法 实验组 (5组 )用磁性细胞分离系统分离BALB/C小鼠 (H 2d ,雌性 )早期造血细胞 (HC) ,经逆转录病毒法转移外源mFasLcDNA基因并扩增 1w后与BAC小鼠 (H 2d×b ,雄性 )骨髓单个核细胞 (BMMC)按 0 .6 2 5∶1混合培养 1w ,经尾静脉将 5× 10 6个混合细胞 (0 .5ml)注入经全身60 Coγ照射的BALB/C小鼠。同时设立 :1组 (空白对照组 ,未移植细胞 ) ;2组 (同基因BMT组 ) ;3组 (转染外源FasL的同基因BALB/CHC +正常BALB/C小鼠BMMC混合培养后移植组 ) ;4组 (H 2单倍型不同小鼠的allo BMT组 )。观察移植鼠的造血重建及细胞来源、GVHD、生存率和造血重建后的免疫学特征。结果 BMT后 +10d、+2 0d ,实验组、3和 4组的外周血白细胞、血小板计数均低于 2组 (P <0 .0 1) ,但 +30d后以上各组则均恢复正常。实验组中存活 2个月的 8只BALB/C小鼠 ,其BMMC中供体来源Y染色体出现率为 (81.14± 5 .3) % ,其中 1例脾细胞基因组DNA经PCR检出Neor 和mFasLcDNA整合 ;各组移植 2个月后的生存率为 :实验组 80 %、1组 0 %、2、3组均为 10 0 %、4组 2 0 % ,经对数秩和检验Ka
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