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【摘要】目的:探讨AT1R和AT2R在妊娠高血压疾病患者中的表达及临床意义。方法应用免疫组化法检测80例妊娠期高血压疾病患者及60例正常妊娠妇女胎盘中AT1R和AT2R的表达。结果妊娠高血压疾病组胎盘AT1R表达水平显著高于正常妊娠组（p＜0.01）。轻、重度子痫前期患者胎盘组织中AT1R表达强度明显高于正常妊娠组（p＜0.05）.AT2R的表达在正常妊娠组及子痫前期患者胎盘中表达均无表达。结论妊娠高血压疾病患者中AT1R表达水平的变化与妊娠高血压疾病的发病及病情发展有关。
【关键词】妊娠高血压疾病;AT1R;AT2R;免疫组织化学
【中图分类号】R654 【文献标识码】B 【文章编号】1005-0515(2011)05-0296-02
妊娠高血压综合征( PIH) 是一种妊娠期特有的疾病, 基本病理变化为全身细小动脉的痉挛，它严重地威胁着母婴安全与健康,是孕产妇和早产儿死亡的主要原因之一。肾素- 血管紧张素系统(RAS) 是一种激素内分泌系统,它在调节心血管功能及水盐平衡中起重要作用。血管紧张素Ⅱ﹙ AngⅡ﹚是肾素血管紧张素系统的最为重要的生物活性物质,通过与其特异性膜受体血管紧张素受体(ATR) 结合而发挥其生物学效应。本研究采用免疫组织化学方法检测妊娠期高血压疾病患者胎盘中AT1R和AT2R的表达,以探讨其在妊娠期高血压疾病发病中的作用。
1 资料与方法
1.1 实验对象:随机收集我院2008年12月～2009年10月产科住院的孕产妇共140 例,其中妊娠期高血压疾病患者80 例(妊娠期高血压40例,轻度子痫前期20例,重度子痫前期20例) ,正常孕妇60例。妊娠期高血压疾病的诊断标准参照乐杰主编的《妇产科学》第7版[1]。两组孕妇年龄、孕周均无显著性差异（P>0.05）。均为初产、单胎，排除产科合并症及并发症。新生儿体重及胎盘重量之间比较差异有显著性(P< 0.05) 。见表1。
1.2 实验方法:采用过氧化物酶标记的链酶亲和素( SABC) 法。特异性兔抗人AT1R抗体工作浓度为1∶50, 特异性兔抗人AT2R抗体工作浓度为1∶50,由武汉博士德生物工程有限公司提供。SABC试剂盒及全部免疫组化染色所用试剂均购自武汉博士德生物工程有限公司。实验步骤按试剂盒说明书严格进行。
表1 两组间一般临床资料比较( x ±s)
组别例数年龄（岁）孕龄（天）新生儿体重（g） 胎盘重量（g）
正常妊娠组 60 27.60±3.59 279.30±5.63 3567.92±267.55654.67±58.96
妊娠期高血压疾病组80 26.90±6.11 265.50±6.95 3169.37±369.66702.25±54.68
妊娠期高血压组40 27.44±2.06 272.22±4.02 3501.67±385.45719.60±45.23
轻度子痫前期组20 26.68±4.31 256.46±7.65 3156.54±523.44657.25±45.57
重度子痫前期组20 26.75±3.69 261.96±5.60 2854.45±785.33596.3±76.19
1.2.3 统计学方法:采用SAS 8. 1 软件,方差分析(SNK法)对试验结果进行统计学处理。
2 结果
2.1 胎盘组织AT1R表达细胞定位正常妊娠患者胎盘组织中,AT1R 主要表达于绒毛合体滋养层及血管内皮细胞中。妊高征患者胎盘组织中, AT1R 主要表达于绒毛合体滋养层及血管扁平内皮细胞, 中、重度妊高征组更加明显，表达部位在细胞膜和细胞浆。
2.3 胎盘组织中AT1R表达强度比较胎盘组织中AT1R表达强度见表2。妊娠期高血压疾病组与正常妊娠组比较胎盘组织中AT1R表达明显增强, 差异有极显著性( P < 0.01) ，轻、重度子痫前期组间AT1R表达强度无显著性差异( P > 0.05),见表2。
表2 各组孕妇胎盘组织AT1 R表达强度比较
组别(%) 例数 AT1R- + ++ +++阳性率(%)
正常妊娠组 60 2810157 53.33
妊娠期高血压疾病组 80 16146 4 60.00
妊娠期高血压组 40 15 12103 62.50
轻度子痫前期组 20 55 5 5 75.00
重度子痫前期组 20 47 0 9 80.00
3 讨论
3.1 AngⅡ、AT1R、AT2R与妊娠AT1R 发现于脑、肾脏、心脏、血管及子宫、卵巢、胎盘等生殖器官中[2-3]。正常妊娠时胎盘有AT1R 表达,AT1R mRNA 在胎盘中孕6周后可发现,而孕10 周后才定位,足月妊娠时达最高水平[4]。AT2R广泛分布于胎儿组织，在胎儿内高表达，出生后迅速下降。血管紧张素Ⅱ也作用于A1r2R，激活缓激肽B2受体与NO合成、舒张血管、降低血压[5]；其也参与促进细胞凋亡，对抗ATl受体的促心血管增殖与重构作用；病理状态下如创伤愈合、血管损伤和心肌梗死，AT2R能被诱导产生。
3.2 AngⅡ、AT1R、AT2R与妊娠期高血压疾病研究证实, 孕早期滋养细胞对螺旋小动脉的浸润过浅, 影响“血管重铸”过程,导致胎盘缺血、缺氧,引起广泛的血管内皮细胞损伤, 最终发展为妊娠期高血压疾病[6]。Leung 等[7]证实妊高征患者的胎盘组织中AT1R 的表达显著高于正常对照组;但Le2ung 等[8]在另一个研究中提示可能与慢性缺氧有关。本实验采用免疫组化SABC法对妊娠期高血压疾病患者及正常产妇胎盘组织中AT1R和AT2R的表达进行检测, 结果提示AT1R 与妊娠期高血压疾病的发生及病情发展有关。
总之,胎盘中AngⅡ及AT1R水平升高可通过多途径影响胎盘血流灌注,使胎盘缺血缺氧,导致妊娠期高血压疾病的发生。AT2R的激活能抑制肾小球旁细胞肾素的合成与释放，从而发挥抗高血压作用，而本实验在正常妊娠和妊娠高血压疾病孕妇胎盘中的血管中均未检测出AT2R的表达，目前对AT2R的认识上不全面，因此有必要对其生理和病理状态的表达、定位、信号转导机制以及调节因素等方面进行更加深入研究。
参考文献
[1] 乐杰主编1妇产科学〔M〕1第6版, 北京: 人民卫生出版社,2004: 97
[2] Dinh TD , Frauman AG, Johnston CI , et al . Angiotensin receptors : distri2 bution , signaling and function. Clinical Science , 2001 , 100 :4812492
[3] Cooper AC , Robinson G, Vinson GP , et al . The localization and expression of the renin angiotensin system in the human placenta throughout pregnancy. Placenta , 1999 , 20 : 46724
[4] Nielsen AH , Schauser KH and Poulsen K. Current topic : the uteroplacental rennin - angiotensin system. Placenta , 2000 ,21 :4682474
[5] Widdop RE，Vinh A，Henrion D，et a1．Vascular angiotensin AT2 reptors in ．hypertension and ageing[J]．Clin Exp Pharmacol Physiol，2008，35(9)：386-390
[6] Granger JP, Alexander BT, LinasMT et al1Pathophysiology of hyper2 tension during p reeclamp sia linking p lacental ischemia with endothelial dysfunction 〔J〕1Hypertension, 2001, 38 (3) : 718
[7] Leung PS , Tsai SJ , Wallukat G, et al . The upregulation of angiotensin Ⅱ receptor AT1 in human preeclamptic placenta. Mol Cell Endocrinol ,2001 ,184 : 952102
[8] Leung PS , Lam SYand Fung ML. Chronic hypoxia upregulates the expres2 sion and function of AT1 receptor in rat carotid body. J Endocrinol , 2000 , 167 :5172524
作者单位：277500 山东滕州市妇幼保健院
【关键词】妊娠高血压疾病;AT1R;AT2R;免疫组织化学
【中图分类号】R654 【文献标识码】B 【文章编号】1005-0515(2011)05-0296-02
妊娠高血压综合征( PIH) 是一种妊娠期特有的疾病, 基本病理变化为全身细小动脉的痉挛，它严重地威胁着母婴安全与健康,是孕产妇和早产儿死亡的主要原因之一。肾素- 血管紧张素系统(RAS) 是一种激素内分泌系统,它在调节心血管功能及水盐平衡中起重要作用。血管紧张素Ⅱ﹙ AngⅡ﹚是肾素血管紧张素系统的最为重要的生物活性物质,通过与其特异性膜受体血管紧张素受体(ATR) 结合而发挥其生物学效应。本研究采用免疫组织化学方法检测妊娠期高血压疾病患者胎盘中AT1R和AT2R的表达,以探讨其在妊娠期高血压疾病发病中的作用。
1 资料与方法
1.1 实验对象:随机收集我院2008年12月～2009年10月产科住院的孕产妇共140 例,其中妊娠期高血压疾病患者80 例(妊娠期高血压40例,轻度子痫前期20例,重度子痫前期20例) ,正常孕妇60例。妊娠期高血压疾病的诊断标准参照乐杰主编的《妇产科学》第7版[1]。两组孕妇年龄、孕周均无显著性差异（P>0.05）。均为初产、单胎，排除产科合并症及并发症。新生儿体重及胎盘重量之间比较差异有显著性(P< 0.05) 。见表1。
1.2 实验方法:采用过氧化物酶标记的链酶亲和素( SABC) 法。特异性兔抗人AT1R抗体工作浓度为1∶50, 特异性兔抗人AT2R抗体工作浓度为1∶50,由武汉博士德生物工程有限公司提供。SABC试剂盒及全部免疫组化染色所用试剂均购自武汉博士德生物工程有限公司。实验步骤按试剂盒说明书严格进行。
表1 两组间一般临床资料比较( x ±s)
组别例数年龄（岁）孕龄（天）新生儿体重（g） 胎盘重量（g）
正常妊娠组 60 27.60±3.59 279.30±5.63 3567.92±267.55654.67±58.96
妊娠期高血压疾病组80 26.90±6.11 265.50±6.95 3169.37±369.66702.25±54.68
妊娠期高血压组40 27.44±2.06 272.22±4.02 3501.67±385.45719.60±45.23
轻度子痫前期组20 26.68±4.31 256.46±7.65 3156.54±523.44657.25±45.57
重度子痫前期组20 26.75±3.69 261.96±5.60 2854.45±785.33596.3±76.19
1.2.3 统计学方法:采用SAS 8. 1 软件,方差分析(SNK法)对试验结果进行统计学处理。
2 结果
2.1 胎盘组织AT1R表达细胞定位正常妊娠患者胎盘组织中,AT1R 主要表达于绒毛合体滋养层及血管内皮细胞中。妊高征患者胎盘组织中, AT1R 主要表达于绒毛合体滋养层及血管扁平内皮细胞, 中、重度妊高征组更加明显，表达部位在细胞膜和细胞浆。
2.3 胎盘组织中AT1R表达强度比较胎盘组织中AT1R表达强度见表2。妊娠期高血压疾病组与正常妊娠组比较胎盘组织中AT1R表达明显增强, 差异有极显著性( P < 0.01) ，轻、重度子痫前期组间AT1R表达强度无显著性差异( P > 0.05),见表2。
表2 各组孕妇胎盘组织AT1 R表达强度比较
组别(%) 例数 AT1R- + ++ +++阳性率(%)
正常妊娠组 60 2810157 53.33
妊娠期高血压疾病组 80 16146 4 60.00
妊娠期高血压组 40 15 12103 62.50
轻度子痫前期组 20 55 5 5 75.00
重度子痫前期组 20 47 0 9 80.00
3 讨论
3.1 AngⅡ、AT1R、AT2R与妊娠AT1R 发现于脑、肾脏、心脏、血管及子宫、卵巢、胎盘等生殖器官中[2-3]。正常妊娠时胎盘有AT1R 表达,AT1R mRNA 在胎盘中孕6周后可发现,而孕10 周后才定位,足月妊娠时达最高水平[4]。AT2R广泛分布于胎儿组织，在胎儿内高表达，出生后迅速下降。血管紧张素Ⅱ也作用于A1r2R，激活缓激肽B2受体与NO合成、舒张血管、降低血压[5]；其也参与促进细胞凋亡，对抗ATl受体的促心血管增殖与重构作用；病理状态下如创伤愈合、血管损伤和心肌梗死，AT2R能被诱导产生。
3.2 AngⅡ、AT1R、AT2R与妊娠期高血压疾病研究证实, 孕早期滋养细胞对螺旋小动脉的浸润过浅, 影响“血管重铸”过程,导致胎盘缺血、缺氧,引起广泛的血管内皮细胞损伤, 最终发展为妊娠期高血压疾病[6]。Leung 等[7]证实妊高征患者的胎盘组织中AT1R 的表达显著高于正常对照组;但Le2ung 等[8]在另一个研究中提示可能与慢性缺氧有关。本实验采用免疫组化SABC法对妊娠期高血压疾病患者及正常产妇胎盘组织中AT1R和AT2R的表达进行检测, 结果提示AT1R 与妊娠期高血压疾病的发生及病情发展有关。
总之,胎盘中AngⅡ及AT1R水平升高可通过多途径影响胎盘血流灌注,使胎盘缺血缺氧,导致妊娠期高血压疾病的发生。AT2R的激活能抑制肾小球旁细胞肾素的合成与释放，从而发挥抗高血压作用，而本实验在正常妊娠和妊娠高血压疾病孕妇胎盘中的血管中均未检测出AT2R的表达，目前对AT2R的认识上不全面，因此有必要对其生理和病理状态的表达、定位、信号转导机制以及调节因素等方面进行更加深入研究。
参考文献
[1] 乐杰主编1妇产科学〔M〕1第6版, 北京: 人民卫生出版社,2004: 97
[2] Dinh TD , Frauman AG, Johnston CI , et al . Angiotensin receptors : distri2 bution , signaling and function. Clinical Science , 2001 , 100 :4812492
[3] Cooper AC , Robinson G, Vinson GP , et al . The localization and expression of the renin angiotensin system in the human placenta throughout pregnancy. Placenta , 1999 , 20 : 46724
[4] Nielsen AH , Schauser KH and Poulsen K. Current topic : the uteroplacental rennin - angiotensin system. Placenta , 2000 ,21 :4682474
[5] Widdop RE，Vinh A，Henrion D，et a1．Vascular angiotensin AT2 reptors in ．hypertension and ageing[J]．Clin Exp Pharmacol Physiol，2008，35(9)：386-390
[6] Granger JP, Alexander BT, LinasMT et al1Pathophysiology of hyper2 tension during p reeclamp sia linking p lacental ischemia with endothelial dysfunction 〔J〕1Hypertension, 2001, 38 (3) : 718
[7] Leung PS , Tsai SJ , Wallukat G, et al . The upregulation of angiotensin Ⅱ receptor AT1 in human preeclamptic placenta. Mol Cell Endocrinol ,2001 ,184 : 952102
[8] Leung PS , Lam SYand Fung ML. Chronic hypoxia upregulates the expres2 sion and function of AT1 receptor in rat carotid body. J Endocrinol , 2000 , 167 :5172524
作者单位：277500 山东滕州市妇幼保健院