【摘 要】
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目的 探究锌指转录因子3(zic3)基因对斑马鱼早期脑血管发育的影响及其机制.方法 利用CRISPR/Cas9技术获得zic3基因突变体,以野生型斑马鱼(AB品系)为对照,统计各个基因型72 hpf(hour post fertilization)胚胎脑出血比例.利用血管标记转基因鱼AB(Tg flk1∶gfp)与zic3突变体杂交,将得到的zic3+/-(Tg flk1∶gfp)进行自交得到同窝对照,使用激光共聚焦显微镜观察72 hpf胚胎血管发育表型(n=30),利用RT-PCR检测相关基因表达.结果
【机 构】
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400010重庆,重庆医科大学附属第二医院生殖医学中心,发育生物学研究室;400030重庆,重庆大学生物工程学院
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目的 探究锌指转录因子3(zic3)基因对斑马鱼早期脑血管发育的影响及其机制.方法 利用CRISPR/Cas9技术获得zic3基因突变体,以野生型斑马鱼(AB品系)为对照,统计各个基因型72 hpf(hour post fertilization)胚胎脑出血比例.利用血管标记转基因鱼AB(Tg flk1∶gfp)与zic3突变体杂交,将得到的zic3+/-(Tg flk1∶gfp)进行自交得到同窝对照,使用激光共聚焦显微镜观察72 hpf胚胎血管发育表型(n=30),利用RT-PCR检测相关基因表达.结果 成功获得了zic3纯合突变体并经基因测序验证.与对照组相比,zic3纯合突变体存在明显的出血表型,且质膜膜泡关联蛋白(plasmalemma vesicle associated protein,Plvap)基因与zic2基因的表达量明显升高(P＜0.05),但杂合突变体未观察到此表型.在杂合突变体中,后脑血管发育出现明显抑制,血管数量相比野生型降低60％(P＜0.05),存在明显发育缺陷.同时非经典Wnt信号通路基因(wnt5a、wnt7ba、wnt9b)以及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)通路基因(kdrl、vegfab、ephrlnB2)表达量均明显上升(P＜0.05).结论 在斑马鱼中zic3功能可被zic2进行代偿,zic3通过抑制plvap的表达降低胚胎脑血管通透性,通过抑制非经典Wnt信号和VEGF信号通路调控胚胎脑血管发育.
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摘要：目的： 了解儿保门诊中婴幼儿屈光现状，对屈光异常者及时进行眼保健检查，早期干预，结合家庭健康教育，降低幼儿期视力低常的发生率。方法： 应用Suresight手持式视力筛查仪，对2014年8月至12月期间在我院门诊儿保的6月—4岁2334例婴幼儿进行视力筛查，其中男童1236例，女童1098例；6月-2岁1469例，2岁-3岁609例，3岁-4岁256例。根据测试结果，对视力筛查结果异常的可疑
目的:对Web of Science数据库收录的有关灸法文献进行可视化分析,探索灸法在国际上的研究状况及研究热点.方法:在Web of Science核心数据中以“Moxibustion”为检索主题词,年限为2010-2019年,将纳入的文献应用Cite Space 5.5.R2、Bicomb 2及SPSS 21.0对作者、机构、国家进行共现分析,对被引文献、作者进行共被引分析,最后对高频关键词进行聚类分析.结果:最终纳入文献1076篇.频次排前5位的作者分别是HUANGAN WU(67次)、HUIRON
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