【摘 要】
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目的探讨重组可溶性CD40配体(recombinant soluble CD40ligand,rsCD40L)对汉黄芩素诱导的抗肿瘤作用的影响及其作用机理。方法采用乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测rsCD40L与汉黄
【机 构】
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四川大学华西基础医学与法医学院,四川大学华西药学院,四川大学华西第二医院西部妇幼研究院分子与转化医学实验室,
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目的探讨重组可溶性CD40配体(recombinant soluble CD40ligand,rsCD40L)对汉黄芩素诱导的抗肿瘤作用的影响及其作用机理。方法采用乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测rsCD40L与汉黄芩素共处理对卵巢癌细胞株SKOV3的细胞毒作用;吖啶橙/溴化乙锭双重染色后荧光显微镜下观察处理后细胞形态学改变;采用Western blot检测细胞凋亡相关分子caspase-8、caspase-3、多聚ADP核糖聚合酶的变化,在此基础上,加入caspase抑制剂Z-VAD-FMK和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)中和抗体,采用LDH释放实验,进一步检测阻断这些信号通路对肿瘤细胞死亡的影响。结果 rsCD40L可增强汉黄芩素对SKOV3细胞的杀伤作用(P<0.05)。随着汉黄芩素剂量的增加,对肿瘤细胞的杀伤作用也随之增强(P<0.05)。经rsCD40L与汉黄芩素共处理的SKOV3细胞呈现典型的凋亡形态学改变;caspase信号通路被显著活化,且caspase抑制剂Z-VAD-FMK可抑制增强的细胞毒作用。TNF-α中和抗体也可抑制这一增强的细胞毒作用。结论 rsCD40L可增强汉黄芩素诱导的肿瘤细胞死亡,其机理与增强肿瘤细胞凋亡及诱导TNF-α的自分泌有关,提示将rsCD40L和汉黄芩素合用具有潜在的抗肿瘤作用价值。
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