【摘 要】
：
目的 研究LIM激酶1(LIMK1)小干扰RNA (siRNA)敲低后对人胶质瘤细胞系SNB19侵袭迁移能力的影响及机制. 方法 (1)免疫组化染色检测对照脑组织及胶质母细胞瘤组织中LIMK1蛋白的
【机 构】
：
天津医科大学总医院神经外科, 天津,300052
论文部分内容阅读
目的 研究LIM激酶1(LIMK1)小干扰RNA (siRNA)敲低后对人胶质瘤细胞系SNB19侵袭迁移能力的影响及机制. 方法 (1)免疫组化染色检测对照脑组织及胶质母细胞瘤组织中LIMK1蛋白的表达.(2)将SNB19分为3组:siRNA-LIMK1组(转染siRNA-LIMK1干扰片段)、siRNA-NC组(转染对照siRNA片段)、空白对照组(未转染).采用实时定量(RT-PCR)法和Western blotting法检测3组细胞中mRNA和蛋白的表达情况.划痕实验和Transwell侵袭实验评价3组细胞的迁移和侵袭能力.免疫荧光法观察3组细胞的定位以及细胞片状伪足形态变化.Western blotting法检测3组细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9以及丝切蛋白(cofilin)、磷酸化cofilin (p-cofilin)的表达. 结果 (1)免疫组化结果显示蛋白在对照脑组织呈弱阳性表达,而在胶质母细胞瘤中呈强阳性表达.(2)siRNA-LIMK1组细胞mRNA和蛋白较其他2组细胞均明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05).划痕实验和Transwell侵袭实验显示3组细胞创面愈合率、侵袭细胞数分别为34.33％±1.53％、75.67％±2.08％、78.33％±1.53％及40.33±5.03、136.67±5.13、143.33±2.52,差异均有统计学意义(F=608.59,P=0.000;F=515.52,P=0.000);其中siRNA-LIMK1组创面愈合率、侵袭细胞数较其他2组明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05).免疫荧光结果显示LIMK1表达于细胞质特别富集于细胞前缘的片状伪足处,siRNA-LIMK1组细胞片状伪足较siRNA-NC组和空白对照组明显变小甚至不伸展.Western blotting结果显示,与siRNA-NC组和空白对照组比较,siRNA-LIMK1组MMP-2、MMP-9以及p-cofilin的表达量均明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05);而cofilin的表达量无明显变化,差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 沉默LIMK1的表达可有效抑制体外胶质瘤细胞系的侵袭和迁移,LIMK1可能成为脑胶质瘤的新的治疗靶点.
其他文献
目的探讨人羊膜间充质干细胞(hAMSC)培养上清液(hAMSC－CS)对人Fb生物学功能的影响。方法(1)取废弃胎盘新鲜羊膜组织，分离hAMSC，并进行传代培养。倒置相差显微镜下观察培养3 d及第3代hAMSC形态。(2)取2批次第3代hAMSC，免疫荧光染色法检测细胞波形蛋白表达，流式细胞仪检测细胞表面标志物CD90、CD73、CD105及CD45表达。(3)收集培养72 h的第3代hAMSC－
在Ar和H2的混合气氛下采用直流磁控溅射在玻璃衬底上低温沉积Al掺杂ZnO,即ZnO∶Al透明导电薄膜,研究H2流量(0～10sccm)对薄膜结构、形貌、光学和电学性能的影响。结果表明:不同
着色芽生菌病是由暗色孢科的一组致病真菌引起的皮肤和皮下组织感染，由于病原菌在组织内呈硬壳细胞，引起的组织变化由感染性肉芽肿逐渐发展成较广泛的皮肤纤维化，故临床治疗较困
基于周期性阵列角锥结构星载微波辐射热定标源,运用时域有限差分算法(Finite Difference Time Domain,FDTD),建立有限大辐射体电磁波散射模型,探索该结构下热定标源在6.3～ 230
国防动员潜力资源是国防动员的核心,通过对国防动员潜力资源信息进行科学分类和规划,设计了国防动员潜力信息库的逻辑架构、部署结构、层次模型和入库流程,为国防动员信息系
发展高光谱微波辐射计对于提升大气参数反演精度具有重要意义.利用微波辐射传输模型mpm93以及BP神经网络方法分别构建正演上行辐射亮温和反演大气温度廓线的模型,并研究了晴
本文结合北京地铁四号线工程的设计经验,分析了确定区间联络通道位置时应考虑的因素。
Combined with the design experience of Beijing Metro Line 4 project, this paper
目的分析DYT6型肌张力障碍患者的临床资料，总结DYT6型肌张力障碍的临床表现和影像学特点。方法对北京协和医院2009年6月至2012年5月经基因检查证实的11例DYT6型肌张力障碍患者进行回顾性分析，包括性别、起病年龄、起病部位、病变分布、家族史等资料。所有患者均进行了常规头部MRI检查，6例患者进行了DTI检查。结果11例经基因检查证实的DYT6型肌张力障碍患者中，男性7例，女性4例，起病年龄
当前我们处于信息时代,信息技术在各个领域都有着广泛的应用.将信息技术引入到水文勘测工作中来,不仅可以有效的提高水文勘测的质量,而且对促进水文勘测信息化建设具有极为重