人白介素21Trx融合表达、纯化、复性以及活性检测

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全合成人IL-21基因,将IL-21编码区使用XhoI和NcoI位点插入pET32a构建原核表达载体,IPTG诱导表达,经DEAE-SepheroseFF柱和HisTrapFF柱纯化,SDS-PAGE和Western印迹检测融合蛋白的表达,MTT法检测Trx-hIL-21对Jurkat细胞的作用。获得了人IL-21的基因序列,SDS-PAGE检测可见33ku大小的融合蛋白表达,Western印迹表明其可以与抗IL-21单抗反应。Trx-hIL-21以剂量依赖的方式作用于Jurkat细胞的生长,当PHA浓度小于2μg/ml时,IL-21能刺激细胞增殖;当PHA浓度大于2μg/ml时,IL-21能抑制细胞增殖。
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