【摘 要】
：
目的:构建hITF基因传递系统,检测其细胞转染效果.方法:首先构建肠三叶因子(intestinal trefoil factor,ITF)的真核表达载体,再利用复凝法制备壳聚糖纳米粒,用透射电镜观察纳
【机 构】
：
徐州医学院附属淮海医院,中国人民解放军第九七医院烧伤科,江苏徐州221004
论文部分内容阅读
目的:构建hITF基因传递系统,检测其细胞转染效果.方法:首先构建肠三叶因子(intestinal trefoil factor,ITF)的真核表达载体,再利用复凝法制备壳聚糖纳米粒,用透射电镜观察纳米粒的形态及大小,并利用HEK293细胞检验纳米粒的转染能力,最后利用RT-PCR和Western blot检测目的基因的转录及表达情况.结果:成功构建出hITF真核表达载体,利用复凝法制备了不同N/P比的壳聚糖纳米粒,透射电镜观察到粒度＜1 000 nm,粒径呈窄分布;荧光显微镜及流式细胞仪检测显示,壳聚糖纳米粒对HEK293细胞的转染率约为80％,和脂质体的转染率基本一致;RT-PCR和Western blot检测说明hITF被成功转录并分泌表达.结论:成功构建了hITF理想的基因传递系统,为壳聚糖介导hITF基因治疗的应用打下基础.
其他文献
目的 :研究子痫前期患者血清中的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)-2和MMP-9及其抑制因子(tissue inhibitors of matrix metalloproteinases,TIMP)2与TIMP1的
目的 :分析近5年感染性心内膜炎(infective endocarditis,IE)的流行病学特点、临床特点、并发症、微生物学及预后,提高该疾病的临床诊疗水平。方法:回顾性分析2009年8月~2014
目的:构建含有人磷脂酰肌醇3-激酶p1 10γ(phosphatidylinositol 3-kinase,catalytic subunit gamma,PI3KCG)基因的慢病毒载体,鉴定其在乳大鼠原代心肌细胞中的表达并作初步
目的 :通过检测牙科常用金合金及镍铬合金的细胞毒性及两种金属材料浸提液对小鼠成纤维细胞L929凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达的影响,来研究金属离子与L929细胞凋亡的关系,探讨
目的:研究Periostin基因多态性与汉族人群心力衰竭发病的关系.方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态法(PCR-RFLP)检测Periostin基因启动子区功能性位点(SNP C-33G)基因
青春期前,儿童发生恶性黑色素瘤的几率极低,在20岁以下人群中不常见(约占2％),几乎不发生于2岁以下的新生儿.但是值得注意的是,对于那些具有巨大先天性痣(giant congenital nae
目的:分析孕妇妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)发病情况及危险因素.方法:收集2012年1月1日～2013年12月31日本院产科门诊随诊并住院分娩的孕妇资料2 748例,通
目的:观察F0代孕鼠围产期不同时期双酚A(bisphenol A,BPA)暴露对子代小鼠海马中淀粉样蛋白前体(amyloid precursor protein,APP)、微管相关蛋白(microtubule-associated prot
目的:研究肝癌细胞中EP3受体剪接体亚型的表达类型及其调控肝癌细胞生长的功能。方法:EP3受体激动剂Sulprostone处理肝癌细胞株观察其生长情况;二维电泳和质谱分析研究EP3受
目的:比较两种不同内固定方法治疗髌骨横行骨折的疗效.方法:回顾分析2013年2月－2015年2月本院手术治疗的69例髌骨横行骨折患者,其中43例采用钢丝环扎加张力带内固定术,26例采