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目的 观察神经胶质瘤致病因子-1(Gli-1)在肾癌细胞株769-P细胞体外侵袭活性强化中的作用.方法 构建Gli-1-小干扰RNA (siRNA)慢病毒载体,将体外培养好的肾癌769-P细胞株分为3组:A组:Gli-1-siRNA和pGCL-绿色荧光蛋白(GFP)共转染组.B组:未转染组;C组:pGCL和pHelper 1.0共转染组.A组为实验组,B、C两组为对照组.应用基因转染方法,将A组肾癌769-P细胞转染Gli-1-siRNA慢病毒载体.检测Gli-1基因表达对肾癌细胞株769-P细胞的抗增殖作用和生物学功能的影响,通过Western blot和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测Gli-1-siRNA在769-P细胞中的表达水平,并通过噻唑蓝(MTT)法、划痕实验、流式细胞仪、显微镜等观察比较转染Gli-1-siRNA的769-P细胞的的迁移能力、黏附能力和凋亡等形态学改变.结果 (1)阴性对照组的Gli-1 mRNA表达量为98.2 ±6.6,Gli-1-siRNA转染组为53.8 ±4.6,差异有统计学意义(P<0.05).(2)阴性对照组的Gli-1蛋白表达量为94.9±7.9,Gli-1-siRNA转染组为42.6±3.2,差异有统计学意义(P<0.05).(3)划痕实验结果显示Gli-1-siRNA转染的769-P细胞株迁移能力低于正常769-P细胞株(P<0.05).(4) MTT实验结果显示,Gli-1-siRNA对769-P细胞的活性抑制明显增强,相同作用时间不同比例之间差异有统计学意义(P<0.05),同一比例不同作用时间之间差异有统计学意义(P<0.01).(5)流式细胞术检测结果显示,B、C组769-P细胞12 h的凋亡率为(10.67±0.23)%和(6.84±0.16)%,A组细胞12h凋亡率为(45.40±5.79)%,24h凋亡率为(60.67±5.79)%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).(6)A组Gli-1-siRNA转染成功的769-P细胞其胞质内出现颗粒状物,肾癌细胞逐渐模糊、消失.24h后769-P细胞数明显减少,48 h后癌细胞大部分凋亡,细胞漂浮,并且在培养液中出现细胞碎片.B、C组769-P细胞状况良好,未见明显细胞减少.结论 Gli-1-siRNA可抑制肾癌769-P细胞中Gli-1的表达,降低细胞增殖率和侵袭能力,提示Gli-1可能在肾癌的恶性进展中发挥重要作用.