【摘 要】
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为建立猪呼吸道病相关的几种病毒PCR/RT-PCR检测方法,根据GenBank登录的猪伪狂犬病病毒(PRV,gB,AF257079)、猪圆环病毒2型(PCV-2,ORF2,NC-005148)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(P
【机 构】
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贵州大学动物科学学院; 贵州省动物疫病预防控制中心;
【基金项目】
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贵州省科学技术基金项目([2013]2110号);贵州省2014年农业攻关项目([2014]3055号)
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为建立猪呼吸道病相关的几种病毒PCR/RT-PCR检测方法,根据GenBank登录的猪伪狂犬病病毒(PRV,gB,AF257079)、猪圆环病毒2型(PCV-2,ORF2,NC-005148)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV,ORF6,NC-001961)、猪瘟病毒(CSFV,C,AY805221)、猪细小病毒(PPV,NS1,NC-001718)和猪流感病毒(SIV,M,GU086140)6种常见病毒的相关保守基因序列分别设计一对特异性引物,通过对其条件的优化,建立了检测以上6种病毒的PCR/RT-PCR诊断方法,扩增的目的片段长度分别为192bp(PRV)、255bp(PCV-2)、364bp(PRRSV)、530bp(CSFV)、759bp(PPV)和981bp(SIV)。通过试验证明该检测方法具有良好的特异性和敏感性,对该6种病毒的核酸检测最小量依次为2.5×10-3ng、2.2×10-4ng、3.2×10-3ng、8.3×10-3ng、3.7×10-3ng和3.7×10-3ng,为检测以上6种病毒提供了参考。
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