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[摘要]目的对SQA-V全自动精子质量分析仪与传统检测法的精液各项主要参数进行统计比较，并对男性不育症原因进行探讨。方法对75例精液标本采用SQA-V全自动精子质量分析仪进行检测，同时与传统手工法进行对照。结果在检测精子密度，精子活率和（A+B）级精子活力百分率的结果上SQA-V全自动精子质量分析仪与手工法的结果无显著性差异（P＞0.05）。结论SQA-V全自动精子质量分析仪与传统的手工法比较，在各主要参数上具有较好的一致性，可替代作为常规手工精液检查方法。在检测出的主要参数中，正常形态精子率下降和精子活力下降是导致男性不育症的主要因素。
关键词：SQA－V精子质量分析仪正常形态精子率精子活力男性不育症
中图分类号：R446 文献标识码：B 文章编号：1004-7484（2011）11-0144-03
1前言
近年临床研究表明，不孕不育症呈上升趋势［1］。传统观点认为，女性是引起不孕的主要原因。研究表明：大约有30%的不孕症是由男方引起。随着男性学科的迅速发展，男性生育调节已成为人类共同关注的问题。目前用于评价男性生殖功能的精液分析主要是指精子数量、精子结构、精子活动力和活动率等指标。临床资料表明［2］，男性不育症中约75%是因为精子数量过少或者是精子活力低弱所致。SQA－V精子质量分析仪(sperm quality analyzers)，采用光电技术、计算机技术、显微镜视像技术检测，无需人工计数，具有客观性、高精度、高效率，正常样品检测时间短，大大提高了工作效率［3］。而传统的精子形态评估是在普通光学显微镜下进行人工计数分析，其结果受检测人员主观因素影响较大。
本文统计了从2010年12月10日～2011年5月7日间在我院门诊及住院的男性不育病例共75例，就SQA－V精子质量分析仪与传统手工检测法的各项主要参数进行比较，报告如下。
2对象与方法
1．受检对象: 2010年12月10日～2011年5月7日间来我院就诊的门诊及住院的男性不育患者共75例，年龄23～46岁，平均年龄为30岁。
2．仪器和方法
(1)仪器: SQA－V精子质量分析仪(sperm quality analyzers)。
(2)方法:严格按照《全国临床检验操作规程》第三版《精液检验》标本收集的方法进行患者标本采集［4］，即：采样前至少禁欲3～7天，手淫(不能使用避孕套)将全部射精精液用清洁干燥广口塑料或玻璃小瓶收集后于30分钟内送到检验科，标本传送时温度应在25℃～37℃之间，容器上注明患者姓名和标本号码(或者条码号)，检验申请单上注明采集日期和时间、未射精天数。精液在60min内未液化时需要加注射用糜蛋白酶(4000U/ml)3～5滴进行处理才能上机检测。
3结果
用SPSS统计软件对75例患者精液进行了以下几个主要项目的统计，见表1。
表1SQA-V与手工检测主要参数的相关性比较(x±s，n=80)
项目 SQA-V检测值 手工检测值 t值 P值
精子密度(×106/ml)64.74±30.34 61.83±31.201.89 ＞0.05
精子活率(% ) 58.28±22.47 56.73±21.83 1.67 ＞0.05
A+B级精子(% ) 47.46±20.49 45.67±19.141.90＞0.05
SQA－V精子质量分析仪和手工检测的相关性: 75例精液标本经SQA－V精子质量分析仪检测，其精子密度、活率及(A+B)级精子活力百分率结果与手工精液分析的结果具有高度相关性并且差异无统计学意义(P＞0.05)，见表1。
4讨论
4.1 正常的精液分析结果
正常男性一次排出精液约2～5ml，呈灰白或乳白色(长时间未排精者可呈淡黄色)；正常精液标本37℃保温30min后完全液化，最多不超过60min。正常精子密度(50～100)×109/L，精子活动率应大于60%，射精后60min内A级精子大于或等于25%或A级+B级大于或等于50%，精子畸形率小于10%。
4.2 结果
75例精液标本中，88.0%(66/75)的患者正常形态精子率下降(平均正常形态精子率只有12.2%)，精子活力下降(A级+B级＜50%)占74.7%(56/75)，41.3%(31/75)患者精子凝集增加，30.7%(23/75)的标本黏稠度异常，液化时间延长者占30.7%(23/75)，白细胞数升高(≥1×106/ml)占22.7%(17/75)，10.7%(8/75)的患者精子数下降，其中无精子症患者占1.98%(25/1264)，颜色异常者占9.2%(116/1264)，3.3%(42/1264)的患者精液量异常。结论：SQA－V精子质量分析仪检测出的主要参数中，正常形态精子率下降和精子活力下降是导致男性不育症的最重要因素。
4.2.1 精液常规分析是评价男性生育能力的最终基本检查方法之一，传统的手工法最大的缺点与不足是容易受到检测者的主观因素的影响，尤其是在精子的活动力方面的检测很大程度上依赖于观察者的经验[5]。近几年来，随着计算机技术的发展，一些自动化的系统逐步推向市场，SQA-V系统就是利用光电比浊原理和特定数学模型对较大样本量精液进行自动检测的一种新兴的精液分析系统，是一款唯一结合光学检测和内置计算机处理系统的紧凑型台式分析仪，它利用检测光通过精液，精液中的精子、细胞、颗粒等产生不同的衍射或散射光信号，仪器检测收集其信号，分析其信号特点，根据特定的数学模型，计算出精子密度，分辨出不同活动程度的精子[6]。本文只统计了几个主要检测项目，但该仪器提供的其它检测参数对男性不育症原因的分析值得进一步探讨。
本文结果表明，SQA-V和传统手工法的检测结果比较无显著性差异，且SQA-V避免了精液常规分析因实验条件、技术人员水平等原因造成的误差，对精液质量的评价具有更好的客观性和真实性，为男性不育的诊断、治疗和研究提供了更为科学的依据[7]。与传统手工法相比， SQA-V可以在较短检测时间内简便、快速、准确的测定精子密度、活力、活率等主要参数，能客观的反映精液质量与生育能力的情况。
4.2.2 按照世界卫生组织(WHO)制定的第五版精液分析标准化手册精液检查新标准:A级(快速前进运动)和B级(慢速前进运动)加起来超过50%，一次射精精子总数3800万以上，正常形态精子(即：完整的“小蝌蚪”)只要达到4%或以上即为正常。本组检测结果证明：88.0%的患者正常形态精子率下降(平均数只有12.2%)、精子活力下降(A+B级＜50%)占74.7%(56/75)、精子凝集的存在(有41.3%的精液标本有不同程度的凝集现象)、黏稠度增加(30.7%的标本黏稠度异常)、液化时间延长(有23例标本液化时间超过60min)、白细胞增多(有17份精液标本中的白细胞数超过了1×10 6/ml)、精子数减少(10.7%的患者精子数少于3800万/次)是男性不育的主要原因。谢小毛等认为精液中白细胞数增高时(≥1×106/ml)，精子的主要参数包括密度(×106/ml)、活动率(%)、A+B活力(%)、顶体酶阳性率(%)、低渗肿胀率(%)明显降低，而畸形率(%)和AsAb阳性率(%)明显增高［8］。不液化的精液在女性生殖道内的运动明显受到障碍，精子不能上行进入宫颈管，子宫腔及输卵管不能与卵子相遇，因此不能使女方受孕［9］。精液黏度增加可影响精子活动力和运动方式，降低精子受孕能力，在引起男性不育的同时还可能因为损害精子DNA导致辅助生殖技术助孕失败［10］。
4.2.3 本文中精液液化时间异常的占总病例数的30.7%。精液不液化或液化不完全，可以抑制精子的活力，从而减少了受孕的机会，其主要原因可能是因为前列腺分泌液化因子减少，导致蛋白水解酶缺乏，或前列腺炎症时破坏蛋白水解酶的活性而引起。但是液化时间正常者中，也存在精液射出后不呈胶冻状或者黏稠度低的情况，这也属异常。多见于输精管缺陷或先天性的精囊缺如。再则对于酸性磷酶(AGP)、黏酰氨酶、精胺酸水解酶、糜蛋白酶等与精液液化的影响都有一定的关系，可进一步探讨。
周其赵等报道，精子活力不足、少精子症、弱精子症和畸形精子症是导致男性不育的重要因素，其中精子活力不足占74.6%，与本文统计数据相近［11］。体内受精研究也表明，精液中正常形态精子百分率越高，精子体内受精率也越高［12］无精子症常见的原因是(1)精索静脉曲张是青年男子的一种常见病，精索里的静脉由于某种原因导致血液滞留受阻，血液淤积，造成精索里的蔓状静脉丛迂曲、伸长和扩张，在阴囊里形成蚯蚓状的团块而引起。精索静脉曲张者有9%可引起不育，男性不育者有39%是精索静脉曲张引起的。严重者可以引起睾丸萎缩。其原因是患侧阴囊内温度升高并反射至对侧，使精原细胞退化、萎缩，精子数减少;或者是由于左肾上腺分泌的无羟色胺或类固醇经左精索内静脉反流入睾丸引起精子减少。(2)生殖系统的非特异性炎症，最常见的就是前列腺炎。前列腺炎引起不育的原因是前列腺液是精液的组成成分之一，炎症状态下前列腺分泌前列腺液减少，从而使精液量减少，干扰了精子的生存和活动，同时使前列腺液中的酶活性下降，精液黏度增加，液化时间延长。另外，炎症存在可使精液的pH值改变，并使集体产生抗精子抗体，使精子死亡同时炎症状态下含有大量的细菌和细菌毒素，可消耗精浆中的营养成分，影响精子的存活。(3)重金属损害，如铅、镉中毒还有长期服用棉酚类药物等，其毒性成分对精子的存活和活力都有很大的影响。还有放射性损伤对精子的影响也不可忽视。
综上所述，男性精液质量的下降是导致不育的重要因素之一。对于不育夫妇，男性精液常规的检测仍然是一种简便、可靠、必要的初步筛选项目，结合检测结果，进一步分析病因，对症治疗，可达治愈目的。
参考文献
[1] World Health Organization．WHO Laboratory Manual for Examination of human semen and Semen－Cervical Mucus Interaction［M］. Cambridge,UK: Cambridge University Press, 1999.
[2] 陈兆干,王君.25年来精液变化的统计分析［J］.中国男科学杂志,2001,15(3):188.
[3] 蔡婷.328例精液SQAⅡB常规临床分析体会［J］.中国现代药物应用,2009,3(2):75～76.
[4] 叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程［M］.东南大学出版社,2006,319～323．
[5] 龚平,周治兰,王昌富.伟力彩色精子质量分析系统的使用评价[J].中国优生与遗传杂志, 2006,14(5):123～124.
[6] SuzukiT, ShibaharaH, TsunodaH, et a.l Comparison of the Sperm QualityAnalyzer IIC variableswith the computer-aided sperm analysis estimates[J]. Int JAndra,l 2002, 25(1):49～54.
[7] 许瑞娜,许业栋,李娴.精液分析仪与传统检测法的对比[J].实用医技杂志, 2007,14(25): 3420～3421.
[8] 谢小毛,黄开淑,李文华,等.精液白细胞浓度与精子主要参数的相关性分析［J］.中国优生与遗传杂志,2009,17(1):93～94.
[9] 王永红,王晓红,刘芳.铜仁地区2447人次男性不育症精液检测结果分析［J］.吉林医学,2009,30(11):1008.
[10]夏薇,苏宁,王维.精液黏度与精液分析参数及男性不育的关系［J］.中国当代医药,2010,16(15):46～47.
[11]周其赵,陈思梅,冯春琼,等.精子质量与形态学分析及其关系［J］.实用医学杂志,2009,25(14):2248～2250.
[12]黄荷凤.现代辅助生育技术［M］.北京:人民军医出版社,2003.79.
关键词：SQA－V精子质量分析仪正常形态精子率精子活力男性不育症
中图分类号：R446 文献标识码：B 文章编号：1004-7484（2011）11-0144-03
1前言
近年临床研究表明，不孕不育症呈上升趋势［1］。传统观点认为，女性是引起不孕的主要原因。研究表明：大约有30%的不孕症是由男方引起。随着男性学科的迅速发展，男性生育调节已成为人类共同关注的问题。目前用于评价男性生殖功能的精液分析主要是指精子数量、精子结构、精子活动力和活动率等指标。临床资料表明［2］，男性不育症中约75%是因为精子数量过少或者是精子活力低弱所致。SQA－V精子质量分析仪(sperm quality analyzers)，采用光电技术、计算机技术、显微镜视像技术检测，无需人工计数，具有客观性、高精度、高效率，正常样品检测时间短，大大提高了工作效率［3］。而传统的精子形态评估是在普通光学显微镜下进行人工计数分析，其结果受检测人员主观因素影响较大。
本文统计了从2010年12月10日～2011年5月7日间在我院门诊及住院的男性不育病例共75例，就SQA－V精子质量分析仪与传统手工检测法的各项主要参数进行比较，报告如下。
2对象与方法
1．受检对象: 2010年12月10日～2011年5月7日间来我院就诊的门诊及住院的男性不育患者共75例，年龄23～46岁，平均年龄为30岁。
2．仪器和方法
(1)仪器: SQA－V精子质量分析仪(sperm quality analyzers)。
(2)方法:严格按照《全国临床检验操作规程》第三版《精液检验》标本收集的方法进行患者标本采集［4］，即：采样前至少禁欲3～7天，手淫(不能使用避孕套)将全部射精精液用清洁干燥广口塑料或玻璃小瓶收集后于30分钟内送到检验科，标本传送时温度应在25℃～37℃之间，容器上注明患者姓名和标本号码(或者条码号)，检验申请单上注明采集日期和时间、未射精天数。精液在60min内未液化时需要加注射用糜蛋白酶(4000U/ml)3～5滴进行处理才能上机检测。
3结果
用SPSS统计软件对75例患者精液进行了以下几个主要项目的统计，见表1。
表1SQA-V与手工检测主要参数的相关性比较(x±s，n=80)
项目 SQA-V检测值 手工检测值 t值 P值
精子密度(×106/ml)64.74±30.34 61.83±31.201.89 ＞0.05
精子活率(% ) 58.28±22.47 56.73±21.83 1.67 ＞0.05
A+B级精子(% ) 47.46±20.49 45.67±19.141.90＞0.05
SQA－V精子质量分析仪和手工检测的相关性: 75例精液标本经SQA－V精子质量分析仪检测，其精子密度、活率及(A+B)级精子活力百分率结果与手工精液分析的结果具有高度相关性并且差异无统计学意义(P＞0.05)，见表1。
4讨论
4.1 正常的精液分析结果
正常男性一次排出精液约2～5ml，呈灰白或乳白色(长时间未排精者可呈淡黄色)；正常精液标本37℃保温30min后完全液化，最多不超过60min。正常精子密度(50～100)×109/L，精子活动率应大于60%，射精后60min内A级精子大于或等于25%或A级+B级大于或等于50%，精子畸形率小于10%。
4.2 结果
75例精液标本中，88.0%(66/75)的患者正常形态精子率下降(平均正常形态精子率只有12.2%)，精子活力下降(A级+B级＜50%)占74.7%(56/75)，41.3%(31/75)患者精子凝集增加，30.7%(23/75)的标本黏稠度异常，液化时间延长者占30.7%(23/75)，白细胞数升高(≥1×106/ml)占22.7%(17/75)，10.7%(8/75)的患者精子数下降，其中无精子症患者占1.98%(25/1264)，颜色异常者占9.2%(116/1264)，3.3%(42/1264)的患者精液量异常。结论：SQA－V精子质量分析仪检测出的主要参数中，正常形态精子率下降和精子活力下降是导致男性不育症的最重要因素。
4.2.1 精液常规分析是评价男性生育能力的最终基本检查方法之一，传统的手工法最大的缺点与不足是容易受到检测者的主观因素的影响，尤其是在精子的活动力方面的检测很大程度上依赖于观察者的经验[5]。近几年来，随着计算机技术的发展，一些自动化的系统逐步推向市场，SQA-V系统就是利用光电比浊原理和特定数学模型对较大样本量精液进行自动检测的一种新兴的精液分析系统，是一款唯一结合光学检测和内置计算机处理系统的紧凑型台式分析仪，它利用检测光通过精液，精液中的精子、细胞、颗粒等产生不同的衍射或散射光信号，仪器检测收集其信号，分析其信号特点，根据特定的数学模型，计算出精子密度，分辨出不同活动程度的精子[6]。本文只统计了几个主要检测项目，但该仪器提供的其它检测参数对男性不育症原因的分析值得进一步探讨。
本文结果表明，SQA-V和传统手工法的检测结果比较无显著性差异，且SQA-V避免了精液常规分析因实验条件、技术人员水平等原因造成的误差，对精液质量的评价具有更好的客观性和真实性，为男性不育的诊断、治疗和研究提供了更为科学的依据[7]。与传统手工法相比， SQA-V可以在较短检测时间内简便、快速、准确的测定精子密度、活力、活率等主要参数，能客观的反映精液质量与生育能力的情况。
4.2.2 按照世界卫生组织(WHO)制定的第五版精液分析标准化手册精液检查新标准:A级(快速前进运动)和B级(慢速前进运动)加起来超过50%，一次射精精子总数3800万以上，正常形态精子(即：完整的“小蝌蚪”)只要达到4%或以上即为正常。本组检测结果证明：88.0%的患者正常形态精子率下降(平均数只有12.2%)、精子活力下降(A+B级＜50%)占74.7%(56/75)、精子凝集的存在(有41.3%的精液标本有不同程度的凝集现象)、黏稠度增加(30.7%的标本黏稠度异常)、液化时间延长(有23例标本液化时间超过60min)、白细胞增多(有17份精液标本中的白细胞数超过了1×10 6/ml)、精子数减少(10.7%的患者精子数少于3800万/次)是男性不育的主要原因。谢小毛等认为精液中白细胞数增高时(≥1×106/ml)，精子的主要参数包括密度(×106/ml)、活动率(%)、A+B活力(%)、顶体酶阳性率(%)、低渗肿胀率(%)明显降低，而畸形率(%)和AsAb阳性率(%)明显增高［8］。不液化的精液在女性生殖道内的运动明显受到障碍，精子不能上行进入宫颈管，子宫腔及输卵管不能与卵子相遇，因此不能使女方受孕［9］。精液黏度增加可影响精子活动力和运动方式，降低精子受孕能力，在引起男性不育的同时还可能因为损害精子DNA导致辅助生殖技术助孕失败［10］。
4.2.3 本文中精液液化时间异常的占总病例数的30.7%。精液不液化或液化不完全，可以抑制精子的活力，从而减少了受孕的机会，其主要原因可能是因为前列腺分泌液化因子减少，导致蛋白水解酶缺乏，或前列腺炎症时破坏蛋白水解酶的活性而引起。但是液化时间正常者中，也存在精液射出后不呈胶冻状或者黏稠度低的情况，这也属异常。多见于输精管缺陷或先天性的精囊缺如。再则对于酸性磷酶(AGP)、黏酰氨酶、精胺酸水解酶、糜蛋白酶等与精液液化的影响都有一定的关系，可进一步探讨。
周其赵等报道，精子活力不足、少精子症、弱精子症和畸形精子症是导致男性不育的重要因素，其中精子活力不足占74.6%，与本文统计数据相近［11］。体内受精研究也表明，精液中正常形态精子百分率越高，精子体内受精率也越高［12］无精子症常见的原因是(1)精索静脉曲张是青年男子的一种常见病，精索里的静脉由于某种原因导致血液滞留受阻，血液淤积，造成精索里的蔓状静脉丛迂曲、伸长和扩张，在阴囊里形成蚯蚓状的团块而引起。精索静脉曲张者有9%可引起不育，男性不育者有39%是精索静脉曲张引起的。严重者可以引起睾丸萎缩。其原因是患侧阴囊内温度升高并反射至对侧，使精原细胞退化、萎缩，精子数减少;或者是由于左肾上腺分泌的无羟色胺或类固醇经左精索内静脉反流入睾丸引起精子减少。(2)生殖系统的非特异性炎症，最常见的就是前列腺炎。前列腺炎引起不育的原因是前列腺液是精液的组成成分之一，炎症状态下前列腺分泌前列腺液减少，从而使精液量减少，干扰了精子的生存和活动，同时使前列腺液中的酶活性下降，精液黏度增加，液化时间延长。另外，炎症存在可使精液的pH值改变，并使集体产生抗精子抗体，使精子死亡同时炎症状态下含有大量的细菌和细菌毒素，可消耗精浆中的营养成分，影响精子的存活。(3)重金属损害，如铅、镉中毒还有长期服用棉酚类药物等，其毒性成分对精子的存活和活力都有很大的影响。还有放射性损伤对精子的影响也不可忽视。
综上所述，男性精液质量的下降是导致不育的重要因素之一。对于不育夫妇，男性精液常规的检测仍然是一种简便、可靠、必要的初步筛选项目，结合检测结果，进一步分析病因，对症治疗，可达治愈目的。
参考文献
[1] World Health Organization．WHO Laboratory Manual for Examination of human semen and Semen－Cervical Mucus Interaction［M］. Cambridge,UK: Cambridge University Press, 1999.
[2] 陈兆干,王君.25年来精液变化的统计分析［J］.中国男科学杂志,2001,15(3):188.
[3] 蔡婷.328例精液SQAⅡB常规临床分析体会［J］.中国现代药物应用,2009,3(2):75～76.
[4] 叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程［M］.东南大学出版社,2006,319～323．
[5] 龚平,周治兰,王昌富.伟力彩色精子质量分析系统的使用评价[J].中国优生与遗传杂志, 2006,14(5):123～124.
[6] SuzukiT, ShibaharaH, TsunodaH, et a.l Comparison of the Sperm QualityAnalyzer IIC variableswith the computer-aided sperm analysis estimates[J]. Int JAndra,l 2002, 25(1):49～54.
[7] 许瑞娜,许业栋,李娴.精液分析仪与传统检测法的对比[J].实用医技杂志, 2007,14(25): 3420～3421.
[8] 谢小毛,黄开淑,李文华,等.精液白细胞浓度与精子主要参数的相关性分析［J］.中国优生与遗传杂志,2009,17(1):93～94.
[9] 王永红,王晓红,刘芳.铜仁地区2447人次男性不育症精液检测结果分析［J］.吉林医学,2009,30(11):1008.
[10]夏薇,苏宁,王维.精液黏度与精液分析参数及男性不育的关系［J］.中国当代医药,2010,16(15):46～47.
[11]周其赵,陈思梅,冯春琼,等.精子质量与形态学分析及其关系［J］.实用医学杂志,2009,25(14):2248～2250.
[12]黄荷凤.现代辅助生育技术［M］.北京:人民军医出版社,2003.79.