【摘 要】
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采用SOE-PCR技术,设计合成hLF18-40的编码基因；以融合表达策略构建了pET-43.1a-hLF18-40表达质粒,并获得较高的可溶融合蛋白表达；将融合蛋白Nus-hLF18-40进行Ni2+柱亲和层析、
【机 构】
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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)
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采用SOE-PCR技术,设计合成hLF18-40的编码基因；以融合表达策略构建了pET-43.1a-hLF18-40表达质粒,并获得较高的可溶融合蛋白表达；将融合蛋白Nus-hLF18-40进行Ni2+柱亲和层析、除盐、浓缩后,用肠激酶切割释放抗茵肽hLF18-40,为今后基因工程法表达人乳铁蛋白肽提供了依据.同时,将hLF18-40的C末端氨基酸逐一缩短直至hLF18-32,用化学法合成hLF18-40、hLF18-39、hLF18-38、hLF18-37、hLF18-36、hLF18-35、hLF18-34、hLF18-33和hLF18-32等9条肽,采用肉汤微量稀释法分别测定其最小抑菌浓度(MIC),结果发现:hLF18-40的MIC为40 μmolL-1,hLF18-39的MIC略微下降(20～40μmol.L-1),hLF18-35的MIC与hLF18-40的相同.
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