【摘 要】
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长链非编码RNA （long noncoding RNA,Lnc RNA）是一类长度大于200个核苷酸且不能编码蛋白质的RNA，可通过多种调控途径作用于皮肤恶性黑色素瘤的增殖、侵袭和转移等。为探究酉州乌羊（Capra hircus） Lnc RNA TCONS＿00153149基因在黑色素沉积过程的调控作用及分子机制，本研究以酉州乌羊和渝东白山羊为对象，验证Lnc RNA TCONS＿001531
【机 构】
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重庆市畜牧科学院/重庆市山羊工程技术研究中心
【基金项目】
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国家自然科学基金（32002206）； 重庆市自然科学基金重点研发项目（cstc2020jcyj-zdxm X0005）； 重庆市市级财政资金项目（01010106）；
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长链非编码RNA （long noncoding RNA,Lnc RNA）是一类长度大于200个核苷酸且不能编码蛋白质的RNA，可通过多种调控途径作用于皮肤恶性黑色素瘤的增殖、侵袭和转移等。为探究酉州乌羊（Capra hircus） Lnc RNA TCONS＿00153149基因在黑色素沉积过程的调控作用及分子机制，本研究以酉州乌羊和渝东白山羊为对象，验证Lnc RNA TCONS＿00153149在不同肤色山羊组织的表达特性，同时分析其在小鼠（Mus musculus） B16-F10黑色素细胞分化阶段的表达特征，通过构建Lnc RNA TCONS＿00153149的慢病毒表达载体，转染B16-F10黑色素细胞，探究Lnc RNA TCONS＿00153149对黑色素沉积的调控作用。结果显示Lnc RNA TCONS＿00153149在酉州乌羊和渝东白山羊不同组织中均有不同程度的表达，且酉州乌羊皮肤组织中的相对表达量极显著高于渝东白山羊（P＜0.01）;Lnc RNA TCONS＿00153149的表达在黑色素细胞分化前期呈上升趋势，分化第3天相对表达量达到最高，其后呈递减趋势，在分化第7天达到最低，其在第3天的相对表达量极显著高于分化第0、1和7天（P＜0.01）；转染B16-F10细胞发现，与转空载体组（negative control group,NC）相比，转染Lnc RNA TCONS＿00153149基因的黑色素细胞中，Lnc RNA TCONS＿00153149基因相对表达量极显著提高（P＜0.01），黑色素含量显著升高，这些结果验证了Lnc RNA TCONS＿00153149基因对黑色素沉积的显著促进作用。同时，黑色素沉积相关基因酪氨酸酶相关蛋白1（TYRosinase related protein 1,TYRP1）、小眼畸形转录因子（microphthalmia-associated transcription factor,MITF）、酪氨酸酶相关蛋白2基因（TYRosinase-related protein 2,TYRP2）相对表达量显著升高（P＜0.05）,Agouti信号蛋白（agouti signaling protein,ASIP）相对表达量极显著降低（P＜0.01）。结合Inta RNA2.0.0软件分析Lnc RNA TCONS＿00153149与色素关键基因的互作结果，本研究推测Lnc RNA TCONS＿00153149基因可能是通过靶向增强黑色素候选基因（TYRP1,TYRP2,MITF,ASIP基因等）的功能，正向调控黑色素的沉积。本研究为明确山羊皮肤着色相关的Lnc RNA调控理论的研究提供了基础资料。
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