【摘 要】
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目的构建两种含有人CD59蛋白突变体的真核表达载体,获得中国仓鼠卵巢（CHO）细胞真核表达系统,为在基因水平阐明糖尿病血管增殖性病变的发病机制奠定基础。方法将两种含有不同突
【机 构】
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青岛大学医学院附属青岛市市立医院内分泌科,青岛大学医学院免疫学教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（30170893）
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目的构建两种含有人CD59蛋白突变体的真核表达载体,获得中国仓鼠卵巢（CHO）细胞真核表达系统,为在基因水平阐明糖尿病血管增殖性病变的发病机制奠定基础。方法将两种含有不同突变体的人CD59全长cDNA序列重组pALTER质粒,应用阳离子脂质体导入法与pcDNA共转染CHO细胞,用G418筛选阳性克隆,应用细胞免疫组化及流式细胞仪检测CD59在CHO细胞表面的表达。结果含有人CD59两种突变体的重组pLATER质粒经酶切和琼脂糖凝胶电泳鉴定,得到长496 bp的电泳条带,与所插入片段完全相符。运用阳离子脂质
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