【摘 要】
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目的 观察在低剂量蟾蜍灵联合全反式维甲酸(ATRA)诱导HL-60细胞向粒-单核细胞分化过程中细胞黏附功能的变化,检测黏附相关蛋白Pyk2及其底物蛋白Paxillin表达的变化,并探讨蛋
【机 构】
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中国医科大学附属第一医院肿瘤内科,沈阳,110001
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目的 观察在低剂量蟾蜍灵联合全反式维甲酸(ATRA)诱导HL-60细胞向粒-单核细胞分化过程中细胞黏附功能的变化,检测黏附相关蛋白Pyk2及其底物蛋白Paxillin表达的变化,并探讨蛋白酶体通路对细胞黏附功能以及Pyk2和Paxillin表达的影响.方法 采用流式细胞术检测细胞CD11b的表达;采用MTT法检测细胞黏附能力;采用Western blot技术检测Pyk2、Paxillin和微管蛋白(Tubulin)的表达水平.结果 低剂量蟾蜍灵+ATRA联合用药以时间依赖性的方式诱导HL-60细胞分化,CD11b阳性率在处理2 d和4 d分别为(20.0±2.8)%和(75.0±5.3)%,并伴有细胞黏附功能苘的上调.同时Pyk2和Paxillin表达水平的上调也呈时间依赖性.蛋白酶体抑制剂硼替佐米以剂量依赖性的方式抑制细胞黏附能力,0、1和10 nmol/L硼替佐米处理的HL-60细胞的黏附水平分别为(9.4±0.8)%、(7.8±0.1)%和(5.3±0.3)%,硼替佐米处理组同时伴有Pyk2表达水平的下调,但Paxillin的表达不受影响.结论 Pyk2参与细胞黏附功能的调节;蛋白酶体通路抑制剂PS-341可能通过下调Pyk2表达,抑制HL-60细胞黏附功能.
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