【摘 要】
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目的:探讨姜黄素联合KLF8-siRNA干扰对肺癌A549细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其机制.方法:采用脂质体法将KLF8-siRNA干扰序列转染至体外培养的A549细胞中,RT-PCR和Western blot检测转染效果.实验分为NC组(转染阴性对照)、KLF8-siRNA组(转染KLF8-siRNA)、Cur组(给予40μmol/L的姜黄素)和KLF8-siRNA+Cur组(转染KLF8-siRNA后给予姜黄素处理).采用MTT法和平板克隆实验检测细胞的增殖活力,Transwell小室和划痕实验检测
【机 构】
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郑州大学附属郑州中心医院肿瘤内科,河南 郑州 450000
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目的:探讨姜黄素联合KLF8-siRNA干扰对肺癌A549细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其机制.方法:采用脂质体法将KLF8-siRNA干扰序列转染至体外培养的A549细胞中,RT-PCR和Western blot检测转染效果.实验分为NC组(转染阴性对照)、KLF8-siRNA组(转染KLF8-siRNA)、Cur组(给予40μmol/L的姜黄素)和KLF8-siRNA+Cur组(转染KLF8-siRNA后给予姜黄素处理).采用MTT法和平板克隆实验检测细胞的增殖活力,Transwell小室和划痕实验检测细胞迁移,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白 β-catenin、c-Myc、CyclinD1、MMP-2和Survivin的表达.结果:转染KLF8-siRNA后A549细胞中KLF8 mRNA和蛋白的表达水平明显降低.与NC组相比,转染KLF8-siRNA或者给予姜黄素处理后细胞存活率、克隆形成率、迁移细胞数、迁移率均明显降低,而细胞凋亡率明显升高,同时β-catenin、c-Myc、CyclinD1、MMP-2和Survivin蛋白的表达水平均明显下降(P<0.05);并且姜黄素联合KLF8-siRNA干扰后对A549细胞的上述作用较两者单独作用更为显著(P<0.05).结论:KLF8-siRNA干扰和姜黄素均可抑制A549细胞增殖、迁移并促进细胞凋亡,且两者联合作用更强,其作用机制可能与共同抑制Wnt/β-catenin信号通路活化有关.
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