白癜风患者血清抗黑素细胞抗体的免疫荧光检测

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目的建立抗黑素细胞抗体免疫荧光检测方法,测定白癜风患者血清中抗黑素细胞抗体。方法取外科手术后人眼睑正常皮肤,用胰蛋白酶消化后制成细胞悬液,在M2黑色素细胞选择性培养基中培养,每周传代1次,经4~5次传代,以免疫荧光和多巴胺染色检测培养细胞的纯度和生物学特性,转移到明胶包被的玻璃片上生长至70%融合,丙酮固定后,与不同稀释度的白癜风患者和正常对照血清反应,加入FITC标记的兔抗人抗体,观测荧光染色效果。结果黑素细胞能在培养基中选择性生长,经4~5W培养获得纯的黑素细胞,无成纤维细胞和角质形成细胞的污染。19
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