探讨多巴胺对脂多糖(LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞(MPMs)炎症反应的影响。
方法选择28只C57雄性Toll样受体4(TLR4)基因野生型(TLR4＋/＋)小鼠和6只雄性TLR4基因缺失型(TLR4－/－)小鼠，随机进行腹腔注射巯基乙酸盐肉汤，获取原代MPMs。(1)TLR4＋/＋ MPMs。分为对照组、LPS组、多巴胺预处理组、多巴胺D1类受体拮抗剂组(D1拮抗剂组)、多巴胺D2类受体拮抗剂组(D2拮抗剂组)，其中后两组分别为多巴胺D1类受体拮抗剂和D2类受体拮抗剂处理MPMs 30 min后再用多巴胺＋LPS处理；(2)TLR4＋/＋和TLR4－/－ MPMs。分为LPS组和多巴胺预处理组。LPS组用1 μg/ml LPS刺激MPMs 6 h，多巴胺预处理组用10－4多巴胺作用MPMs 2 h后再用1 μg/ml LPS刺激6 h。Western blot检测各组细胞TLR4、白细胞介素－1β前体(pro－IL－1β)的表达，酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞上清中肿瘤坏死因子－α(TNF－α)的表达。
结果(1)TLR4＋/＋ MPMs TLR4、pro－IL－1β和TNF－α的表达情况：对照组为0.56±0.07、0.65±0.11和(1 770.6±448.8)pg/ml，LPS组为1.12±0.15、1.24±0.20和(15 569.5±822.7)pg/ml，多巴胺预处理组为0.28±0.11、0.22±0.08和(7 800.7±862.6)pg/ml，D1拮抗剂组为0.25±0.12、0.18±0.09和(7 065.0±1 016.8)pg/ml，D2拮抗剂组为0.80±0.09、0.44±0.08和(14 299.6±1 430.9)pg/ml。其中LPS组均高于对照组和多巴胺预处理组(P均<0.05)，D2拮抗剂组均高于多巴胺预处理组(P<0.05)，而D1拮抗剂组与多巴胺预处理组差异无统计学意义(P>0.05)。(2) pro－IL－1β和TNF－α的表达情况：LPS组TLR4＋/＋ MPMs为0.94±0.17和(15 109.0±1 903.4)pg/ml，TLR4－/－ MPMs为0.08±0.04和(5 063.6±512.8)pg/ml；多巴胺预处理组TLR4＋/＋MPMs为0.45±0.12和(6 383.9±1 287.3)pg/ml，TLR4－/－ MPMs为0.05±0.02和(4 863.0±824.7)pg/ml。其中LPS组TLR4＋/＋ MPMs的两指标均高于TLR4－/－ MPMs(P均<0.05)。TLR4＋/＋MPMs多巴胺预处理组两指标均低于TLR4＋/＋ MPMs的LPS组(P<0.05)，TLR4－/－ MPMs多巴胺预处理组两指标与TLR4－/－ MPMs LPS组差异无统计学意义。
结论多巴胺能够抑制LPS诱导的MPMs炎症反应，与多巴胺D2类受体和TLR4密切相关。