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【摘 要】微生物广泛地存在于未经处理的各类水中，人们一旦饮用了未经处理的水，可导致人们出现腹泻、呕吐、发烧、传染病等多种健康问题。为了保障饮用水水质符合人的饮用要求，对饮用水中的微生物进行检测非常重要。本文简单介绍了微生物与饮用水的关联，并对如何检测几种水体中常见的微生物进行了介绍。
【关键词】饮用水；微生物；检测；方法
1.前言
水是人类的生命之源，没有水，人类很快就会失去生命。因此，健康的饮用水是保障人类生活质量的最基本要求。大自然中没有经过处理的天然水体中含有很多对人体有益和有害的矿物质、也含有很多微生物和其他杂质，因此是不适合人类直接饮用的，我国城镇居民饮用的自来水都是经过一道道程序严格处理的，但在少数农村地区，还有饮用井水、河水等未经处理的水源，却不曾想到其中的微生物很容易给人体带来危害。
2.微生物与人们的生活饮用水
微生物是一类特殊的生物群体，它包括病毒、真菌、细菌、藻类、霉菌、小型原生生物等一大群个体微小却与人类生活密切相关的生物[1]，对人类来说，微生物也分有益和有害两类，比如人们常喝的酸奶，就是一种添加了乳酸杆菌等有益菌、对人体的消化与吸收功能有所帮助的健康食品，从这个角度看，乳酸杆菌就是对人类有益的微生物。另外，流感是人们生活中不可回避的常见病症，它多数是由病毒、细菌等致病微生物造成。此外还包括由真菌造成的脚气等，可见微生物与我们生活的距离是非常近的。
以饮用水来说，微生物污染仍然广泛地存在于我国各省区，尤其是一些经济相对贫困的地区，以水为媒介的传染病也危害到了当地人民群众的健康安全，比如伤寒、细菌性痢疾、副伤寒、霍乱、隐孢子虫病、传染性肝炎以及贾第鞭毛虫病等，而且煮沸过的水也不能杀灭所有的致病微生物。为了杜绝有害的微生物进入饮用水中，对人们的身体造成损害，我们需要通过一定的技术手段检测出水体中的微生物，这也是做好水质监督的必然要求。2006年前后，我国对饮用水水质标准进行了修订，新的饮用水标准中，微生物方面由原来的两项增加到了六项指标，分别是菌落总数、大肠埃氏菌、总大肠菌群、贾第鞭毛虫、耐热大肠菌群及隐孢子虫，我们在对生活饮用水进行检测时，就以现行标准中提到的这些微生物为主。
3.生活饮用水中微生物的检验方法
我们有必要采取一定的程序和步骤对生活饮用水中的微生物进行检测，笔者总结起来，包括如下方面：
3.1样品采集
样品采集是检测微生物检测过程中的基础步骤，采集样品听起来简单，实则却有不少注意事项，最重要的两点如下：第一，样品应该具有一定代表性，能够反映待检测水体的自然特征。第二，采样应在无菌环境下操作。包括使用的容器，要经过事先的严格杀菌消毒，水样的运输与保存，都要避免受到环境中其他因素的污染。
在坚持以上两点原则的基础上，分清处理过的自来水与水源水两类水的取样方法。对自来水采集来说，由于水中含有余氯，会抑制细菌生长，应首先在采样容器中按照50：1的比例添加浓度为30g/L的硫代硫酸钠，之后再进行灭菌处理。取样时先使用酒精灯灼烧水龙头，目的是消灭水龙头上的细菌，之后将水龙头开到最大，放水五到十分钟，以便排净水管中的积水，然后再进行取样。对江水、湖水、河水、水库水以及井水等地面表水样，首先要注意，采样地点应选择水面以下十至十五厘米处。除此之外，还要注意做好记录工作，包括采样地点、采样人员、采样时间、样品来源、保存条件、运输方式、水温、PH值等，并在采样四小时内完成检验工作。
3.2检验菌落总数
我们一般采用平皿计数的方式对菌落总数进行检测，第一步，在无菌操作的情况下使用灭菌吸管吸取一毫升水样，注入灭菌后的平皿中，紧接着注入十五毫升已经融化并冷却到四十五度的营养琼脂，马上摇匀。第二步，当培养基冷凝后，翻转平皿使其底部冲上，放在三十七度培养箱中培养四十八小时。第三步，四十八小时过后，进行菌落数计量，得出的就是一毫升水样中的细菌总量。需要注意，每进行一次试验，都要做一组对应的平行接种实验，用另外只有营养琼脂的相同平皿进行对照，取样要均匀。此外，水样中的细菌在琼脂中的菌落形式是多样化的，可以是单个的、成对的、成串的或是成团的，计数时以菌落形式为标准。
3.3检验总大肠菌
总大肠菌包括埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属、肠杆菌属等不同菌群，常见检测方法有滤膜法、多管发酵法、酶底物法等[2]。滤膜法操作如下：使用零点四五微米孔径的微孔滤膜过滤水样，然后将微孔滤膜粘在乳糖培养基上，保持三十七度的恒温，培养二十四小时；将产酸产气的发酵管分别接种在伊红美蓝琼脂平板上，放在三十七度恒温箱中培养二十四小时，观察菌落生长形态，挑选符合特征的菌落作革兰氏镜检和证实实验，特别要注意区分是革兰氏阳性菌还是革兰氏阴性菌。酶底物法：在选择性培养基中培养能够产生β-半乳糖苷酶的细菌群组，利用它们分解色原底物时释放的色原体会改变培养基颜色的性质来完成检测。测定方法又分定量测定和定性测定两种，定量法分五十一孔定量法与十管法。酶底物法被世界卫生组织推荐为水质卫生评价标准方法，已经在多个国家、地区、组织中应用，优点是可以同时检测埃希氏菌等，检测时间缩短到十八至二十四小时，另外操作方便，不需要进行确认试验，缺点是检测的成本偏高。
3.4检测耐热大肠菌
耐热大肠菌以耐热克雷伯氏菌等菌属为主，检测方法主要采用多管发酵法及滤膜法。因为菌群耐热，所以采用高温培养，以超过四十四点五度的大肠菌群为主。多管发酵法和滤膜法前面已经介绍过，此处就不再赘述。
3.5检测埃希氏菌
埃希氏菌的检测方法主要指酶底物法、多管发酵法及滤膜法。埃希氏菌的检测有些特殊之处，采用多管发酵法时。首先要在培养基中加入一些荧光底物，四十四点五度环境下培养二十四小时，之后采用六瓦功率的紫外灯照射，会发现菌落出现蓝色荧光，并以荧光的强度和吸收度来判断埃希氏菌的繁育情况。采用滤膜法时也是一样，要在培养基中加入荧光底物，并放在阳性滤膜上培养，温度降低到三十七度，培养时间四个小时即可，同样采取六瓦的紫外灯照射操作。
3.6检测贾第鞭毛虫及隐孢子虫
贾第鞭毛虫及隐孢子虫寄生在人与动物的肠道之中，可在人与动物之间共同传播，卵囊经人与动物的粪便中排出，广泛存在于地面水、防护不良的地下水、处理不达标的自来水中。隐孢子虫是长三至七微米的单细胞原生动物，有三种不同类型，老人、儿童、医务人员及免疫缺陷者都是易感人群，传播方式不仅局限于水源感染，手-口、粪-口及空气都是它的传播途径。贾第鞭毛虫大小为十至十五微米，同样属于单细胞原生动物，以被孢囊污染的食物和水为传染源，遍布世界，可导致肠吸收紊乱、急慢性腹泻，并延缓儿童生长发育。
我国对饮用水中这两种原生动物的限值规定为每十升水少于一个，检测方法分以下几个步骤。首先，对水样进行过滤，其次进行洗涤离心，第三步进行免疫磁珠的分离，第四步进行熒光标记与DAPI染色，第五步在显微镜下检查，第六步形成报告。缺点是检测方法相对复杂，检出概率比较低，无法进行属种鉴定及生物活性的判断，此外价格较高也是一大问题，目前很多实验室无法进行检测，只有通过降低水的浊度来减少风险。
4.结语
病从口入是人人都懂的健康道理，饮用水作为人们每天离不开的生命源泉，其卫生问题更应该得到人们持续的关注。因此，进行饮用水微生物检测意义重大。检测时，首先无菌室要达到检测要求，制备的培养基要满足检测要求，检验人员应按照规范的检测流程及检测标准操作，并合理选择检测方法，以使检测结果准确、可靠，为人民群众的健康饮水、健康生活保驾护航。
参考文献：
[1]蔡怀远.浅析生活饮用水中水中微生物检验探索[J].健康必读（下旬刊），2013，（1）：99-100.
[2]葛子龙.生活饮用水中水中微生物的检验[J].中外健康文摘，2012，（8）：174-177.
【关键词】饮用水；微生物；检测；方法
1.前言
水是人类的生命之源，没有水，人类很快就会失去生命。因此，健康的饮用水是保障人类生活质量的最基本要求。大自然中没有经过处理的天然水体中含有很多对人体有益和有害的矿物质、也含有很多微生物和其他杂质，因此是不适合人类直接饮用的，我国城镇居民饮用的自来水都是经过一道道程序严格处理的，但在少数农村地区，还有饮用井水、河水等未经处理的水源，却不曾想到其中的微生物很容易给人体带来危害。
2.微生物与人们的生活饮用水
微生物是一类特殊的生物群体，它包括病毒、真菌、细菌、藻类、霉菌、小型原生生物等一大群个体微小却与人类生活密切相关的生物[1]，对人类来说，微生物也分有益和有害两类，比如人们常喝的酸奶，就是一种添加了乳酸杆菌等有益菌、对人体的消化与吸收功能有所帮助的健康食品，从这个角度看，乳酸杆菌就是对人类有益的微生物。另外，流感是人们生活中不可回避的常见病症，它多数是由病毒、细菌等致病微生物造成。此外还包括由真菌造成的脚气等，可见微生物与我们生活的距离是非常近的。
以饮用水来说，微生物污染仍然广泛地存在于我国各省区，尤其是一些经济相对贫困的地区，以水为媒介的传染病也危害到了当地人民群众的健康安全，比如伤寒、细菌性痢疾、副伤寒、霍乱、隐孢子虫病、传染性肝炎以及贾第鞭毛虫病等，而且煮沸过的水也不能杀灭所有的致病微生物。为了杜绝有害的微生物进入饮用水中，对人们的身体造成损害，我们需要通过一定的技术手段检测出水体中的微生物，这也是做好水质监督的必然要求。2006年前后，我国对饮用水水质标准进行了修订，新的饮用水标准中，微生物方面由原来的两项增加到了六项指标，分别是菌落总数、大肠埃氏菌、总大肠菌群、贾第鞭毛虫、耐热大肠菌群及隐孢子虫，我们在对生活饮用水进行检测时，就以现行标准中提到的这些微生物为主。
3.生活饮用水中微生物的检验方法
我们有必要采取一定的程序和步骤对生活饮用水中的微生物进行检测，笔者总结起来，包括如下方面：
3.1样品采集
样品采集是检测微生物检测过程中的基础步骤，采集样品听起来简单，实则却有不少注意事项，最重要的两点如下：第一，样品应该具有一定代表性，能够反映待检测水体的自然特征。第二，采样应在无菌环境下操作。包括使用的容器，要经过事先的严格杀菌消毒，水样的运输与保存，都要避免受到环境中其他因素的污染。
在坚持以上两点原则的基础上，分清处理过的自来水与水源水两类水的取样方法。对自来水采集来说，由于水中含有余氯，会抑制细菌生长，应首先在采样容器中按照50：1的比例添加浓度为30g/L的硫代硫酸钠，之后再进行灭菌处理。取样时先使用酒精灯灼烧水龙头，目的是消灭水龙头上的细菌，之后将水龙头开到最大，放水五到十分钟，以便排净水管中的积水，然后再进行取样。对江水、湖水、河水、水库水以及井水等地面表水样，首先要注意，采样地点应选择水面以下十至十五厘米处。除此之外，还要注意做好记录工作，包括采样地点、采样人员、采样时间、样品来源、保存条件、运输方式、水温、PH值等，并在采样四小时内完成检验工作。
3.2检验菌落总数
我们一般采用平皿计数的方式对菌落总数进行检测，第一步，在无菌操作的情况下使用灭菌吸管吸取一毫升水样，注入灭菌后的平皿中，紧接着注入十五毫升已经融化并冷却到四十五度的营养琼脂，马上摇匀。第二步，当培养基冷凝后，翻转平皿使其底部冲上，放在三十七度培养箱中培养四十八小时。第三步，四十八小时过后，进行菌落数计量，得出的就是一毫升水样中的细菌总量。需要注意，每进行一次试验，都要做一组对应的平行接种实验，用另外只有营养琼脂的相同平皿进行对照，取样要均匀。此外，水样中的细菌在琼脂中的菌落形式是多样化的，可以是单个的、成对的、成串的或是成团的，计数时以菌落形式为标准。
3.3检验总大肠菌
总大肠菌包括埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属、肠杆菌属等不同菌群，常见检测方法有滤膜法、多管发酵法、酶底物法等[2]。滤膜法操作如下：使用零点四五微米孔径的微孔滤膜过滤水样，然后将微孔滤膜粘在乳糖培养基上，保持三十七度的恒温，培养二十四小时；将产酸产气的发酵管分别接种在伊红美蓝琼脂平板上，放在三十七度恒温箱中培养二十四小时，观察菌落生长形态，挑选符合特征的菌落作革兰氏镜检和证实实验，特别要注意区分是革兰氏阳性菌还是革兰氏阴性菌。酶底物法：在选择性培养基中培养能够产生β-半乳糖苷酶的细菌群组，利用它们分解色原底物时释放的色原体会改变培养基颜色的性质来完成检测。测定方法又分定量测定和定性测定两种，定量法分五十一孔定量法与十管法。酶底物法被世界卫生组织推荐为水质卫生评价标准方法，已经在多个国家、地区、组织中应用，优点是可以同时检测埃希氏菌等，检测时间缩短到十八至二十四小时，另外操作方便，不需要进行确认试验，缺点是检测的成本偏高。
3.4检测耐热大肠菌
耐热大肠菌以耐热克雷伯氏菌等菌属为主，检测方法主要采用多管发酵法及滤膜法。因为菌群耐热，所以采用高温培养，以超过四十四点五度的大肠菌群为主。多管发酵法和滤膜法前面已经介绍过，此处就不再赘述。
3.5检测埃希氏菌
埃希氏菌的检测方法主要指酶底物法、多管发酵法及滤膜法。埃希氏菌的检测有些特殊之处，采用多管发酵法时。首先要在培养基中加入一些荧光底物，四十四点五度环境下培养二十四小时，之后采用六瓦功率的紫外灯照射，会发现菌落出现蓝色荧光，并以荧光的强度和吸收度来判断埃希氏菌的繁育情况。采用滤膜法时也是一样，要在培养基中加入荧光底物，并放在阳性滤膜上培养，温度降低到三十七度，培养时间四个小时即可，同样采取六瓦的紫外灯照射操作。
3.6检测贾第鞭毛虫及隐孢子虫
贾第鞭毛虫及隐孢子虫寄生在人与动物的肠道之中，可在人与动物之间共同传播，卵囊经人与动物的粪便中排出，广泛存在于地面水、防护不良的地下水、处理不达标的自来水中。隐孢子虫是长三至七微米的单细胞原生动物，有三种不同类型，老人、儿童、医务人员及免疫缺陷者都是易感人群，传播方式不仅局限于水源感染，手-口、粪-口及空气都是它的传播途径。贾第鞭毛虫大小为十至十五微米，同样属于单细胞原生动物，以被孢囊污染的食物和水为传染源，遍布世界，可导致肠吸收紊乱、急慢性腹泻，并延缓儿童生长发育。
我国对饮用水中这两种原生动物的限值规定为每十升水少于一个，检测方法分以下几个步骤。首先，对水样进行过滤，其次进行洗涤离心，第三步进行免疫磁珠的分离，第四步进行熒光标记与DAPI染色，第五步在显微镜下检查，第六步形成报告。缺点是检测方法相对复杂，检出概率比较低，无法进行属种鉴定及生物活性的判断，此外价格较高也是一大问题，目前很多实验室无法进行检测，只有通过降低水的浊度来减少风险。
4.结语
病从口入是人人都懂的健康道理，饮用水作为人们每天离不开的生命源泉，其卫生问题更应该得到人们持续的关注。因此，进行饮用水微生物检测意义重大。检测时，首先无菌室要达到检测要求，制备的培养基要满足检测要求，检验人员应按照规范的检测流程及检测标准操作，并合理选择检测方法，以使检测结果准确、可靠，为人民群众的健康饮水、健康生活保驾护航。
参考文献：
[1]蔡怀远.浅析生活饮用水中水中微生物检验探索[J].健康必读（下旬刊），2013，（1）：99-100.
[2]葛子龙.生活饮用水中水中微生物的检验[J].中外健康文摘，2012，（8）：174-177.