伪狂犬病毒gI基因的克隆表达及其对病毒增殖的影响

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从伪狂犬病毒(PRV)国内地方分离Ea株基因组DNA片段中克隆了完整的gl基因,序列分析结果表明,gl基因编码区全长1101bp,可编码366个氨基酸残基,二级结构预测具有典型Ⅰ型膜蛋白特征.与GenBank中收录的国外Rice株的同源比较发现,Ea株gl在核苷酸和氨基酸水平上均存在多处突变,尤其是潜在胞浆区中连续两个碱基的缺失导致移码突变,致使gl基因的读码框架后移,从而导致Ea株gl较rice株长16个氨基酸残基.将gl基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1+中的人巨细胞病毒早期启动子下游,构建的真核表达质粒转染PK-15细胞,间接免疫荧光检测证实gl获得正确表达.进一步测定天然缺失gl的PRV弱毒Bartha株在表达gI细胞系和空白载体转染的对照细胞系中的蚀斑形成单位(pfu)和组织细胞培养半数感染量(TCID5o),结果显示:Bartha株在表达gl细胞系中的pfu和TCID5o分别为对照细胞系的164%和200%.说明gl具有促进病毒增殖的功能.
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