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【摘 要】目的：全面了解结核分枝杆菌感染在人群中的分布趋势，为结核病的防治提供科学依据。方法：对来自门诊及住院患者的750 份标本进行结核分枝杆菌培养。结果：750份标本有270份呈阳性，阳性率达36%；其中男性患者有240例阳性，占阳性率89%，女性患者30例阳性，占阳性率11%，男性检出率显著高于女性（P<0.05）；男性阳性病例中，又以青壮年检出（≤45岁）多见，有150例占62.5%，青壮年检出率显著高于中老年人（>45岁）（P<0.05），而女性阳性病例的分布情况也类似于男性。结论：结核分枝杆菌感染主要分布于青壮年，应加大结核病控制工作力度，建立检验科质量控制系统，以实现结核病人的高发现率和高治愈率。
【关键词】结核分枝杆菌；结果分析
【中图分类号】R52 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2013）05-0506-02
结核分枝杆菌可经过呼吸道、消化道侵入人体，并可经血液播散，引起所涉部位的感染。结核菌感染的临床症状常可与其他疾病混淆，因此其最后确诊有赖于实验室结核分枝杆菌的检查，结核病诊断的可靠依据是应从病人分离出结核分枝杆菌并得到鉴定。本研究选取我院自2000年2月-2013年3月750份送检结核分枝杆菌标本进行结核分枝杆菌的分离培养，现将结果报告如下：
1 资料和方法
1.1一般资料 750 份标本均来自门诊及住院患者。其中男540份，女210份；年龄8-75岁，平均年龄（41.3±2.6）岁。
1.2 标本的分类 本组研究中痰标本600份，尿标本30份，胸腹水90份，脊髓或心胞穿刺液30份。
1.3实验方法 分枝杆菌培养方法参照结核病细菌学检验规程[1]， 送检标本用4%氢氧化钠处理后，接种于酸性罗氏（L-J）培养基2 支，37℃培养，于接种3～7d 后观察。以后每周观察菌落生长情况，有菌落生长者，经抗酸染色确认送专门实验室作进一步鉴定与药物敏感试验。
2 结果
2.1 750例标本培养有270例阳性，阳性率为36%，其中男性有240例阳性，阳性率占32%，女性有30例阳性，阳性率占4%，≤45岁男性与﹥45岁男性其阳性比：Ⅹ=10.13，P值﹤0.05。男性与女性阳性比：Ⅹ=4.73，P值﹤0.05。≤45岁女性与﹥45岁女性阳性比：Ⅹ=1.5342，P值﹤0.05。 详见表1
3 讨论
近年来，由于耐药结核病的发生与传播，高感染人群或高危人群的流动或移民以及对结核病控制放松等因素，全球结核病疫情呈现回升趋势[2]，结核分枝杆菌的培养是结核病诊断的重要依据，也是考核疗效、评价治疗效果的可靠标准。
3.1 表一中显示750例病人标本阳性270份，阳性率为36%。金晗英报道其结核病人标本培养阳性率为20.55%[3]，与其相比较本研究阳性率较高，与我院临床医生有针对性检验疑是结核分枝杆菌标本有关。
3.2 270例阳性病例中，男性病人阳性有240分，占阳性的89%，女性病人只有30份，占阳性的11%。男性与女性相比其阳性率要高得多，P值﹤0.05，有显著意义。阳性在男性病人中，又以青壮年（≤45岁）为多，阳性150份，占男性阳性的62.5%，≤45岁男性检出较﹥45岁男性阳性率高，P值﹤0.05，有显著意义，与李万青等[4]的报告一致，这类人群属青壮年，且多数是农村的主要劳动力，他们活动范围广泛，接触机会多，男性又有吸烟、酗酒等不良习惯，容易感染和传播结核病，提示青壮年应作为结核病痰涂片AFB检查的重点人群[5]。年青女性比老年女性高，P值﹤0.05，有显著意义，青春期是体内代谢功能和内分泌等发生较大变化，易诱发结核病[6]，陈灏珠认为婴幼儿、青春后期和成年早期尤其是该年龄的女性结核病发病率较高，可能与宿主免疫功能不全或改变有关[7]。
3.3 要确保获得最高的阳性率，以防漏诊，对影响其结果的诸多
因素必须要有十分清楚的认识。影响结核分枝杆菌的培养结果有如下几项因素：
3.3.1样品采集 结核分枝杆菌能从各种临床标本包括痰、尿和脑脊
液及活组织包括肝、骨髓和淋巴结或从任何有结核感染的可疑部位的组织分离出来。疑有混杂其它的细菌标本必须迅速处理以减少培养的污染。必须采集患者早上醒来后咳出的痰或用超声波雾化的晨痰，雾化晨痰的标本不仅可使结核分枝杆菌检出增加，同时污染的机会也比24小时积累的痰少。疑有肺或肾结核的病人必须最少收集清早的3-4份标本，如果标本推迟处理应迅速冷藏。
3.3.2离心 相对离心力用于浓集临床标本时，对抗酸杆菌涂片和培
养阳性的直接相关性，离心浓集结核杆菌时，要注意离心力对于结果的影响，过短的离心时间会减低阳性率，一般不應低于20分钟[8]。
3.3.3培养基 培养基的优劣，尤其是其中的抑菌物质是否合乎
标准，会影响培养的阳性率，我们用的是酸性改良罗氏培养基，其杂菌抑制物为孔雀绿，通常其浓度为0.01-0.02%，如果﹥0.02%则对细菌的生长起延缓的作用。
3.3.4染色 结核分枝杆菌的抗酸染色反应及其特有的形状、大小、
对感染的早期发现和对结核分枝杆菌病治疗监测提供了宝贵帮助。本研究使用的是石碳酸复红染色，该染色方法在染色时间以及温度上不易控制，汤思萍[9]报道，染色温度为70℃染色时间为5 min时，结核杆菌染色更鲜艳。
3.3.5 抗结核药物治疗 病人长期接受抗结核药物的治疗会影响结核分枝杆菌的生长速度或活力，出现可见不可育现象，其主要原因有：待检标本中混入抗结核药物：病人长时间化疗后，细菌死亡或生长极差；实验室检验技术的误差。针对上述种因素，，可采取以下措施：如在收集标本前，停用结核药2-3天；在培养基中加入某种化学物质来消除抗结核药物的作用如活性碳等，以减少结核药物对培养结果的影响。 由于肺结核具有一定程度的传染性，容易在人群中传播，人一旦患病，不但丧失劳动力，而且表现出浑身无力、咳嗽、咳血等症状，给患者带来很大痛苦[10].感染患者的早期发现和及时治疗、切断传染源，是结核病防治工作的重要环节。结核分枝杆菌检查烦琐、耗时长，许多实验室不认真开展，或仅作涂片抗酸染色，常贻误临床的诊断和治疗，病原菌的检出对肺部感染性疾病的诊疗具有重要意义，加强标本质量督查、督导，使标本检验规范化，完善检验科质量控制系统，加强实验室质量控制工作，这对结核病的早期发现，早期治疗，明确诊断有重要的临床意义。
参考文献：
[1] 中国防痨协会基础专业委员会.结核病诊断细菌学检验规程[M]. 北京： 中国教育文化出版社，2006：34.
[2] Lumb R，Bastion I，Carter R，et a1.Tuberculosis in Australia：bacteriologically confirmed cases and drug resistance，2007[J].Commun DisIntell，2009，33（3）：298—303.
[3] 金晗英， 葉森德， 付风云，等. 1100份痰标本结核杆菌涂片镜检与培养结果分析[J]. 2009，21（2）：95.
[4] 李万青，尹红.何凡宁远县2005～2007年结核病例的抗酸杆菌痰涂片镜检分析[J].华南预防医学，2009，35（2）：44—45.
[5] 蒙启飞，李慧雪. 平果县肺结核病人痰涂片检查结果分析[J].广西医学，2010，32（6）：732-734.
[6] 祝斌. 青年女性肺结核的临床特征[J]. 临床肺科杂志，2008，13（11）：1442-1443.
[7] 陈灏珠.实用内科学[M].第10版. 人民卫生出版社，1997，450.
[8] 娄峥 吕绳凯.影响结核分枝杆菌涂片和培养的几项重要因素[J].上海医学检验杂志，2000，15（10）：60.
[9] 汤思萍，黄汝，吴灿等. 结核分枝杆菌抗酸染色法影响因素分析[J] 基层医学论坛，2010，14（4）上旬刊：350-351.
[10] 际不尤.血清胆碱酯酶测定对肺结核诊断的临床价值[J].南通医学院报，2009，9（4）：293.
【关键词】结核分枝杆菌；结果分析
【中图分类号】R52 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2013）05-0506-02
结核分枝杆菌可经过呼吸道、消化道侵入人体，并可经血液播散，引起所涉部位的感染。结核菌感染的临床症状常可与其他疾病混淆，因此其最后确诊有赖于实验室结核分枝杆菌的检查，结核病诊断的可靠依据是应从病人分离出结核分枝杆菌并得到鉴定。本研究选取我院自2000年2月-2013年3月750份送检结核分枝杆菌标本进行结核分枝杆菌的分离培养，现将结果报告如下：
1 资料和方法
1.1一般资料 750 份标本均来自门诊及住院患者。其中男540份，女210份；年龄8-75岁，平均年龄（41.3±2.6）岁。
1.2 标本的分类 本组研究中痰标本600份，尿标本30份，胸腹水90份，脊髓或心胞穿刺液30份。
1.3实验方法 分枝杆菌培养方法参照结核病细菌学检验规程[1]， 送检标本用4%氢氧化钠处理后，接种于酸性罗氏（L-J）培养基2 支，37℃培养，于接种3～7d 后观察。以后每周观察菌落生长情况，有菌落生长者，经抗酸染色确认送专门实验室作进一步鉴定与药物敏感试验。
2 结果
2.1 750例标本培养有270例阳性，阳性率为36%，其中男性有240例阳性，阳性率占32%，女性有30例阳性，阳性率占4%，≤45岁男性与﹥45岁男性其阳性比：Ⅹ=10.13，P值﹤0.05。男性与女性阳性比：Ⅹ=4.73，P值﹤0.05。≤45岁女性与﹥45岁女性阳性比：Ⅹ=1.5342，P值﹤0.05。 详见表1
3 讨论
近年来，由于耐药结核病的发生与传播，高感染人群或高危人群的流动或移民以及对结核病控制放松等因素，全球结核病疫情呈现回升趋势[2]，结核分枝杆菌的培养是结核病诊断的重要依据，也是考核疗效、评价治疗效果的可靠标准。
3.1 表一中显示750例病人标本阳性270份，阳性率为36%。金晗英报道其结核病人标本培养阳性率为20.55%[3]，与其相比较本研究阳性率较高，与我院临床医生有针对性检验疑是结核分枝杆菌标本有关。
3.2 270例阳性病例中，男性病人阳性有240分，占阳性的89%，女性病人只有30份，占阳性的11%。男性与女性相比其阳性率要高得多，P值﹤0.05，有显著意义。阳性在男性病人中，又以青壮年（≤45岁）为多，阳性150份，占男性阳性的62.5%，≤45岁男性检出较﹥45岁男性阳性率高，P值﹤0.05，有显著意义，与李万青等[4]的报告一致，这类人群属青壮年，且多数是农村的主要劳动力，他们活动范围广泛，接触机会多，男性又有吸烟、酗酒等不良习惯，容易感染和传播结核病，提示青壮年应作为结核病痰涂片AFB检查的重点人群[5]。年青女性比老年女性高，P值﹤0.05，有显著意义，青春期是体内代谢功能和内分泌等发生较大变化，易诱发结核病[6]，陈灏珠认为婴幼儿、青春后期和成年早期尤其是该年龄的女性结核病发病率较高，可能与宿主免疫功能不全或改变有关[7]。
3.3 要确保获得最高的阳性率，以防漏诊，对影响其结果的诸多
因素必须要有十分清楚的认识。影响结核分枝杆菌的培养结果有如下几项因素：
3.3.1样品采集 结核分枝杆菌能从各种临床标本包括痰、尿和脑脊
液及活组织包括肝、骨髓和淋巴结或从任何有结核感染的可疑部位的组织分离出来。疑有混杂其它的细菌标本必须迅速处理以减少培养的污染。必须采集患者早上醒来后咳出的痰或用超声波雾化的晨痰，雾化晨痰的标本不仅可使结核分枝杆菌检出增加，同时污染的机会也比24小时积累的痰少。疑有肺或肾结核的病人必须最少收集清早的3-4份标本，如果标本推迟处理应迅速冷藏。
3.3.2离心 相对离心力用于浓集临床标本时，对抗酸杆菌涂片和培
养阳性的直接相关性，离心浓集结核杆菌时，要注意离心力对于结果的影响，过短的离心时间会减低阳性率，一般不應低于20分钟[8]。
3.3.3培养基 培养基的优劣，尤其是其中的抑菌物质是否合乎
标准，会影响培养的阳性率，我们用的是酸性改良罗氏培养基，其杂菌抑制物为孔雀绿，通常其浓度为0.01-0.02%，如果﹥0.02%则对细菌的生长起延缓的作用。
3.3.4染色 结核分枝杆菌的抗酸染色反应及其特有的形状、大小、
对感染的早期发现和对结核分枝杆菌病治疗监测提供了宝贵帮助。本研究使用的是石碳酸复红染色，该染色方法在染色时间以及温度上不易控制，汤思萍[9]报道，染色温度为70℃染色时间为5 min时，结核杆菌染色更鲜艳。
3.3.5 抗结核药物治疗 病人长期接受抗结核药物的治疗会影响结核分枝杆菌的生长速度或活力，出现可见不可育现象，其主要原因有：待检标本中混入抗结核药物：病人长时间化疗后，细菌死亡或生长极差；实验室检验技术的误差。针对上述种因素，，可采取以下措施：如在收集标本前，停用结核药2-3天；在培养基中加入某种化学物质来消除抗结核药物的作用如活性碳等，以减少结核药物对培养结果的影响。 由于肺结核具有一定程度的传染性，容易在人群中传播，人一旦患病，不但丧失劳动力，而且表现出浑身无力、咳嗽、咳血等症状，给患者带来很大痛苦[10].感染患者的早期发现和及时治疗、切断传染源，是结核病防治工作的重要环节。结核分枝杆菌检查烦琐、耗时长，许多实验室不认真开展，或仅作涂片抗酸染色，常贻误临床的诊断和治疗，病原菌的检出对肺部感染性疾病的诊疗具有重要意义，加强标本质量督查、督导，使标本检验规范化，完善检验科质量控制系统，加强实验室质量控制工作，这对结核病的早期发现，早期治疗，明确诊断有重要的临床意义。
参考文献：
[1] 中国防痨协会基础专业委员会.结核病诊断细菌学检验规程[M]. 北京： 中国教育文化出版社，2006：34.
[2] Lumb R，Bastion I，Carter R，et a1.Tuberculosis in Australia：bacteriologically confirmed cases and drug resistance，2007[J].Commun DisIntell，2009，33（3）：298—303.
[3] 金晗英， 葉森德， 付风云，等. 1100份痰标本结核杆菌涂片镜检与培养结果分析[J]. 2009，21（2）：95.
[4] 李万青，尹红.何凡宁远县2005～2007年结核病例的抗酸杆菌痰涂片镜检分析[J].华南预防医学，2009，35（2）：44—45.
[5] 蒙启飞，李慧雪. 平果县肺结核病人痰涂片检查结果分析[J].广西医学，2010，32（6）：732-734.
[6] 祝斌. 青年女性肺结核的临床特征[J]. 临床肺科杂志，2008，13（11）：1442-1443.
[7] 陈灏珠.实用内科学[M].第10版. 人民卫生出版社，1997，450.
[8] 娄峥 吕绳凯.影响结核分枝杆菌涂片和培养的几项重要因素[J].上海医学检验杂志，2000，15（10）：60.
[9] 汤思萍，黄汝，吴灿等. 结核分枝杆菌抗酸染色法影响因素分析[J] 基层医学论坛，2010，14（4）上旬刊：350-351.
[10] 际不尤.血清胆碱酯酶测定对肺结核诊断的临床价值[J].南通医学院报，2009，9（4）：293.