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目的
快速鉴定2014年济南市一起聚集性病毒性脑炎的病原体,分析其流行病学及病原学特征。
方法采用统一的个案调查表对住院患儿逐一进行个案调查。4例患儿均采集粪便和脑脊液标本。采用实时荧光定量(RT)PCR方法检测总肠道病毒(PE)、肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组(CVA)16、10和6型病毒核酸;PE阳性标本采用巢式反转录PCR方法扩增5'-UTR区基因,测定核苷酸序列并进行同源性分析。
结果本起聚集性病毒性脑炎疫情首发病例出现于2014年4月8日,呈人传人的传播模式。RT-PCR结果显示,所有标本PE核酸检测为阳性,而EV71、CVA16、CVA10和CVA6核酸检测均为阴性。5'-UTR区核苷酸序列在美国生物技术信息中心网站经碱基局部对准检索工具分析(http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi)显示与肠道病毒柯萨奇病毒B5(CVB5)同源性最高,彼此之间核苷酸同源性为99.2%~100.0%,与2010年河南株CVB5(HQ998851)的核苷酸同源性为96.7%~97.4%。4例患儿经积极的抗病毒、抗感染及相关对症支持治疗,均痊愈出院,无后遗症发生。
结论本起聚集性病毒性脑炎病原体为CVB5,与2010年河南株CVB5核苷酸同源性最高。RT-PCR和巢式反转录PCR方法可快速、准确地鉴定肠道病毒引起的病毒性脑炎。