【摘 要】
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目的 探讨γ-分泌酶抑制剂(DAPT)对大鼠肾小管上皮(NRK52E)细胞间充质转分化(EMT)的抑制作用及机制.方法 含10μg/L转化生长因子-β1(TGF-β1)的无血清培养基孵育NRK52E细胞48 h构建EMT模型;或10 mol/L DAPT预处理15 min后构建NRK52E细胞EMT模型.Western blot法检测NRK52E细胞Notch-1、Hes-1、α-平滑肌肌动蛋白(
【机 构】
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目的 探讨γ-分泌酶抑制剂(DAPT)对大鼠肾小管上皮(NRK52E)细胞间充质转分化(EMT)的抑制作用及机制.方法 含10μg/L转化生长因子-β1(TGF-β1)的无血清培养基孵育NRK52E细胞48 h构建EMT模型;或10 mol/L DAPT预处理15 min后构建NRK52E细胞EMT模型.Western blot法检测NRK52E细胞Notch-1、Hes-1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏素(E-cadherin)蛋白表达,小室迁移实验检测细胞迁移能力.结果 TGF-β1显著上调NRK52E细胞Notch-1、Hes-1、α-SMA蛋白表达,下调E-cadherin表达,并增强细胞迁移能力[(482.87±78.23)个比(1464.16± 31.82)个,P＜0.05].DAPT可显著抑制TGF-β1诱导的NRK52E细胞Notch-1、Hes-1、E-cadherin、α-SMA蛋白表达的变化及迁移能力的增强[(509.23 ±83.21)个比(1493.64±463.34)个、(983.06±169.49)个,P＜0.05].结论 Notch信号通路的活化参与了TGF-β1诱导NRK52E细胞EMT,DAPT阻断Notch信号通路活性,抑制TGF-β1诱导的NRK52E细胞EMT。
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表皮生长因子受体(EGFR)在肺癌中过表达.在调节肿瘤细胞的生长、修复和生存、新生血管生成、侵袭和转移中具有重要的作用,已经成为治疗肺癌的重要靶点之一[1].我们考虑由于EGFRTKI和EGFR单克隆抗体这两类药物作用靶点的不同,而且有研究认为这两种药物联合应用可以提高疗效,因此我们提出了这两类药物联合应用可能会增强T790M突变的耐药非小细胞肺癌的疗效的假设.一、材料与方法1.试剂:小鼠抗人β-
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