【摘 要】
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目的：构建CYP2E1基因shRNA慢病毒表达载体，为研究CYP2E1在药物代谢和环境污染物代谢中的作用提供技术支持。方法：通过NCBI检索CYP2E1序列，设计合成3对shRNA片段，退火后连接到慢病
【机 构】
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深圳市疾病预防控制中心,深圳大学生命科学学院
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目的：构建CYP2E1基因shRNA慢病毒表达载体，为研究CYP2E1在药物代谢和环境污染物代谢中的作用提供技术支持。方法：通过NCBI检索CYP2E1序列，设计合成3对shRNA片段，退火后连接到慢病毒载体PLK0．1-puro，将重组质粒转化到感受态JM107中。挑取筛选的单菌落，经PCR和测序鉴定后提取质粒。将质粒和包膜蛋白质粒共转染到293FT细胞，收集病毒上清，转导肝细胞L02，利用嘌呤霉素筛选得到CYP2E1缺陷型细胞，最后利用荧光定量PCR和Westernblot鉴定干扰效果。结果：PCR和
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