目的 构建CXCL10-pcDNA3.1(+)重组质粒及稳定转染乳腺癌细胞系MCF-7细胞株,探讨CXCL10对MCF-7细胞株肿瘤相关基因表达的影响.方法 从γ干扰素(IFN-γ)刺激的人外周血单个核细胞中克隆CXCL10基因,构建CXCL10-pcDNA3.1(+)重组质粒,用CXCL10-pcDNA3.1(+)和对照质粒pcDNA3.1(+)分别以脂质体转染MCF-7细胞株,经G418筛选后获得稳定转染细胞株,以逆转录(RT)-PCR鉴定CXCL10基因表达,免疫印迹(WB)及ELISA鉴定CXCL10蛋白表达及分泌.以琼脂克隆形成实验分别计算实验组[转染CXCL10-pcDNA3.1(+)的MCF-7细胞株]、对照组[pcDNA3.1(+)的MCF-7细胞株]及未转染组(未转染的MCF-7细胞株)的细胞增殖活性;RT-PCR鉴定肿瘤相关基因基质金属蛋白酶9(MMP9)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)及信号转导和转录激活因子3(STAT3)在各细胞株中的表达.结果 重组质粒CXCL10-pcDNA3.1(+)及质粒pcDNA3.1(+)稳定转染MCF-7细胞株构建成功;克隆形成率在实验组、对照组及未转染组分别为78.2%、79.9%及87.8%,3组间比较差异无统计学意义(χ2=3.8,P>0.05);实验组细胞能高效表达CXCL10 mRNA,3组间比较差异有统计学意义(F=50.5,P<0.01);ELISA结果显示细胞培养上清液中CXCL10的表达量3组间比较,差异有统计学意义(F=54.8,P<0.01);MMP9基因转录水平在实验组、对照组及未转染组分别为0.067±0.003、0.103±0.007及0.085±0.026,均很低,且组间差异无统计学意义(F=4.2,P>0.05);VEGF在实验组、对照组及未转染组灰度值分别为0.183±0.003、0.787±0.019及0.789±0.011,3组间比较差异有统计学意义(F=2 232,P<0.01);STAT3在实验组、对照组及未转染组灰度值分别为0.573±0.016、0.707±0.008及0.711±0.013,3组间比较差异有统计学意义(F=115,P<0.01).结论 CXCL10能在MCF-7细胞株稳定表达,且CXCL10能抑制MCF-7细胞VEGF及STAT3表达,从而发挥抗肿瘤作用。