【摘 要】
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目的为了构建可分泌表达NanoLuc荧光素酶的重组克里米亚－刚果出血热病毒(Crimean－Congo hemorrhagic fever virus，CCHFV)并探讨其用于抗病毒药物高通量快速初筛的可行性。方法将NanoLuc基因与CCHFV M节段上的mucin编码框融合，拯救重组病毒，并以利巴韦林为阳性对照，评估Furin抑制剂在体外对重组病毒的抑制效果。结果成功获得可分泌表达NanoLu
【机 构】
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430071 武汉，中国科学院武汉病毒研究所,430071 武汉，中国科学院武汉病毒研究所,77555 加尔维斯顿，美国德州大学医学分部微生物与免疫系,
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目的为了构建可分泌表达NanoLuc荧光素酶的重组克里米亚－刚果出血热病毒(Crimean－Congo hemorrhagic fever virus，CCHFV)并探讨其用于抗病毒药物高通量快速初筛的可行性。
方法将NanoLuc基因与CCHFV M节段上的mucin编码框融合，拯救重组病毒，并以利巴韦林为阳性对照，评估Furin抑制剂在体外对重组病毒的抑制效果。
结果成功获得可分泌表达NanoLuc荧光素酶的重组CCHFV(rCCHFV_mucin_NLuc),且在感染细胞上清中，表示NanoLuc活性的相对光单位(relative light unit，RLU)与病毒半数组织感染剂量(TCID50)呈显著正相关性(cor＝0.998, P＝0.001)。10 μmol/L浓度下，Furin抑制剂处理后1～3 d感染细胞上清中NanoLuc荧光素酶活力与利巴韦林处理组无明显差异(P>0.1)，但第4天Furin抑制剂处理组上清中RLU值显著高于利巴韦林处理组(P＝0.001)，且与未处理病毒对照组无明显差异(P > 0.1)。
结论成功构建1株NanoLuc标记的rCCHFV并可用于抗病毒药物的体外快速初筛。
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