【摘 要】
：
目的 探讨副交感神经M1受体(muscarinic acetylcholine M1 receptor,CHRM1)对前列腺癌细胞焦亡的影响及其可能的分子机制.方法 在PC-3细胞中分别于12、24、48 h加入不同浓度CHRM1特异性抑制剂哌仑西平(pirenzepine,PIN)和激动剂氯贝胆碱(bethanechol,BECH),后用慢病毒感染PC-3细胞构建CHRM1敲低的稳转株,再用质粒转染构建成孔蛋白gasdermin D(GSDMD)的敲低细胞模型,CCK-8实验检测细胞增殖能力,乳酸脱氢酶
【机 构】
：
400016重庆,重庆医科大学生命科学研究院
论文部分内容阅读
目的 探讨副交感神经M1受体(muscarinic acetylcholine M1 receptor,CHRM1)对前列腺癌细胞焦亡的影响及其可能的分子机制.方法 在PC-3细胞中分别于12、24、48 h加入不同浓度CHRM1特异性抑制剂哌仑西平(pirenzepine,PIN)和激动剂氯贝胆碱(bethanechol,BECH),后用慢病毒感染PC-3细胞构建CHRM1敲低的稳转株,再用质粒转染构建成孔蛋白gasdermin D(GSDMD)的敲低细胞模型,CCK-8实验检测细胞增殖能力,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)细胞毒性检测试剂检测LDH释放水平,流式细胞术及荧光倒置显微镜下观察Hoechst-PI和Annexin V-PI双染后的PI阳性细胞率,通过透射电镜观察细胞焦亡现象,Western blot检测Caspase-1/GSDMD通路相关分子的表达水平.结果 CHRM1特异性抑制剂哌仑西平及慢病毒敲低CHRM1可使前列腺癌细胞PC-3细胞活力下降(P＜0.05),PI阳性细胞数显著增加(P＜0.01),同时在透射电镜下可观察到明显细胞焦亡现象,而相对的加入激动剂氯贝胆碱可使其细胞活力在一定浓度范围内上升(P＜0.05),PI阳性细胞率减少(P＜0.01);通过药物和慢病毒下调CHRM1之后,Caspase-1/GSDMD通路中的天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)、天冬氨酸蛋白水解酶剪切体-1(cleaved Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、炎症复合体(NLRP3)及GSDMD水平明显上升(P＜0.05);敲低GSDMD之后,PI阳性细胞率降低(P＜0.05),LDH释放率降低(P＜0.001),各相关蛋白水平显著下降(P＜0.01),且抑制或敲低CHRM1后PI阳性细胞率、LDH释放率及各相关蛋白水平无明显回复.结论 下调CHRM1可通过Caspase-1/GSDMD通路诱导前列腺癌细胞焦亡.
其他文献
目的 探讨延胡索酸水合酶缺陷型肾细胞癌(fumarate hydratase-deficient renal cell carcinoma,FH-d RCC)的临床病理学特征,加强对该罕见肿瘤的认识.方法 收集2010-2020年陆军军医大学第一附属医院诊断的2例FH-d RCC患者资料,包括组织病理形态、免疫组织化学染色、荧光原位杂交(FISH)和下一代测序(NGS),并复习相关文献.结果 2例患者均为男性,年龄分别为34和35岁.例1为双肾肿瘤伴肾门淋巴结转移,瘤细胞核级高,呈乳头状、腺管状排列.例2
目的 构建及验证一个用于早期胃癌识别的卷积神经网络模型,旨在提高早期胃癌的检出率.方法 从陆军军医大学西南医院内镜中心数据库收集2016年1月至2020年8月的电子胃镜图片和胃镜检查视频.选取928例患者共5496张包含早期胃癌、良性病变和正常的图片.随机分为训练集(662例患者共4167张包含早期胃癌、良性病变和正常的图片),验证集(259例患者共1329张包含早期胃癌、良性病变和正常的图片)用于模型和4名内镜医师进行识别,最后统计相关结果.再从模型识别出的胃早癌图片中随机选取458张用作模型定位准确度
目的 探讨模拟高原缺氧条件对小鼠焦虑样行为以及抑郁样行为的影响.方法 选用C57成年雄性小鼠,分为3组(n=10):平原对照组,24 h高原缺氧组,7d高原缺氧组.行为学方法检测小鼠焦虑样行为、小鼠短期记忆以及小鼠抑郁样行为;免疫组化检测小鼠下丘脑室旁核C-Fos、AVP和GR免疫反应阳性细胞数量;酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血液中促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)、皮质酮浓度.结
Objective We developed a universal lesion detector (ULDor) which showed good performance in in-lab experiments. The study aims to evaluate the performance and its ability to generalize in clinical setting via both external and internal validation.Methods
脑血管疾病是导致人类死亡和致残的主要原因.动脉粥样硬化是脑血管疾病的病理基础,它是一种以内皮功能障碍以及动脉壁中脂质和巨噬细胞积聚为特征的慢性炎症性疾病.脂蛋白相关的磷脂酶A2 (lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2)被认为是血管炎症和易破裂斑块形成的潜在生物标志物,与心脑血管疾病密切相关.笔者拟就Lp-PLA2在脑血管疾病的相关研究进展进行综述.
ATP敏感性钾通道(ATP-sensitive potassium channels,KATP)是一种在神经系统和外周组织中广泛分布和表达的内向整流钾通道,在耦联细胞能量代谢与细胞兴奋性方面发挥重要作用1-2].目前已有报道证实,KATP通道参与膀胱疾病的发生与发展过程,但其机制尚不明确.因此,阐明KATP通道在膀胱功能障碍中的作用,能够为临床治疗提供新的理论依据.
目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)核仁小RNA宿主基因12(small nucleolar RNA host gene 12,SNHG12)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)发展的调控机制.方法 通过RT-qPCR检测长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA) SNHG12在肝癌组织和肝癌细胞系中的表达水平;分析肝癌组织中LncRNA SNHG12的表达水平与HCC患者临床病理参数的关系;运用MTIT实验、细胞集落形成实验、Trans
目的基于盆底的核磁共振图像(MRI),构建深度学习自动分割模型,进行盆底MRI图像的智能分割研究,以提高肛提肌分割效率和精准度。方法以DenseUnet模型为主干,搭建一个主要由编码器模块、上下文提取模块和解码器模块3部分组成的网络结构;在上下文提取模块中,通过使用空洞卷积和金字塔池化模块克服Unet较少利用上下文信息及不同感受野下的全局信息的缺点,通过19例患者的MRI数据,包括14例正常女性盆
目的 利用成簇的规律间隔短回文重复序列和相关蛋白9(CRISPR/Cas9)基因编辑技术构建Gpr183全基因敲除小鼠模型,并对Gpr183受体在淋巴细胞的调控功能和在急性肝损伤过程中的作用进行了初步分析.方法 根据CRISPR/Cas9基因编辑技术实验方法构建Gpr183全基因敲除纯合子F2代小鼠,随后通过Western blot方法检测野生型和敲除型小鼠肝脏和脾脏组织Gpr183基因蛋白表达水平,并通过免疫荧光(IF)技术分析了野生型和敲除型小鼠脾脏淋巴细胞的分布情况以及IL-17和IL-22的表达水
Objective This study aimed to assess the protective value of adiponectin (APN) in pancreatic islet injury induced by chronic intermittent hypoxia (CIH). Methods Sixty rats were randomly divided into three groups: normal control (NC) group, CIH group, and