【摘 要】
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通过RT-PCR方法,从黑曲霉总RNA中克隆出β-甘露聚糖酶基因manA的成熟肽编码序列。将其与猪腮腺分泌蛋白（parotid secretory protein,PSP）基因的信号肽序列通过重叠延伸PCR方法
【机 构】
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华南农业大学动物科学学院,广东省农业科学院畜牧研究所
【基金项目】
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国家重大专项（2008ZX08006004,2009ZX08006-012B）
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通过RT-PCR方法,从黑曲霉总RNA中克隆出β-甘露聚糖酶基因manA的成熟肽编码序列。将其与猪腮腺分泌蛋白（parotid secretory protein,PSP）基因的信号肽序列通过重叠延伸PCR方法得到拼接片段,并插入到真核表达载体pcD-NA6.0/HisTMA中,得到重组质粒pcDNA-PSmanA。重组质粒经过PCR、酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且读码框完全正确。在脂质体介导下将pcDNA-PSmanA转染猪肾（PK15）细胞进行分泌表达,通过RT-PCR方法证实其在PK15细胞中
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