黄芪当归对药不同剂量与配比对IPF小鼠生存状况及TGF-β、IL-6、Foxp3、RORγt基因表达水平影响

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目的:观察不同剂量与配伍比例的黄芪、当归对药对IPF小鼠生存状况及Th17/Treg细胞分化关键基因TGF-β、IL-6、foxp3、RORγt表达水平的影响,并探讨其相互关系及保护机制。方法:SPF级ICR雄性小鼠80只,体重18~22 g,随机分为正常对照组、模型组、以及6个不同配比与剂量的黄芪当归组成的中药治疗组(1大剂量黄芪当归5∶1组;2大剂量黄芪当归1∶1组;3大剂量黄芪当归1∶5组;4小剂量黄芪当归5∶1组;5小剂量黄芪当归1∶1组;6小剂量黄芪当归1∶5组),每组10只,除正常对照组外,其余各组采用气管内注射博莱霉素(5 mg/kg)复制小鼠肺纤维化模型。造模第2天起,正常对照组和模型组用生理盐水灌胃,6个中药治疗组给予不同配比与剂量的黄芪当归水煎液灌胃治疗,于第28天处死小鼠,采用Real time-RT-PCR法检测Th17/Treg细胞分化关键基因TGF-β、IL-6、foxp3、RORγt表达水平,HE染色及武兆发简化Mallory氏胶原染色,观察肺组织形态变化。结果:HE染色及胶原染色显示,模型组小鼠可见支气管周围及肺泡间隔有大量炎症细胞浸润,纤维化程度明显。中药第1、6组肺泡炎明显好转,肺泡内未见明显的炎性细胞,肺泡隔、细小支气管周围的纤维化病灶较模型组有明显改善。中药第2、3、4、5组肺泡炎较对照组重,但与模型组比较有很大程度的减轻,肺泡隔纤维增生灶较模型组有所改善,但不如第1、6组明显。第28天时,模型组小鼠体重明显低于对照组,与模型组比较,各组小鼠体重均呈上升的趋势,中药第1组小鼠体重上升趋势较大(P<0.05)。第28天死亡率,中药治疗组小鼠的死亡率较模型组降低,其中第1组死亡率与模型组的差异有统计学意义(P<0.05)。模型组TGF-β、RORγt、IL-6 m RNA表达水平均高于对照组,Foxp3 m RNA表达水平均低于对照组(P<0.05)。结论:从小鼠的生存率与体重变化及病理形态观察来看,大剂量黄芪当归5∶1组能明显改善小鼠的生存质量,其作用机制可能与抑制Th17分化关键基因TGF-β、IL-6、RORγtm RNA的表达水平,促进Treg分化关键基因Foxp3 m RNA的表达水平有关。
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