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摘 要:目的:对延胡索所具有的化学成分进行研究,并探讨其质量控制方法。方法:对国内外相关的文献进行查阅,分析和归纳延胡索化学成分和质量控制方面的主要方法。结果:经分析确定延胡索中含有的主要化学成分就是生物碱类。结论:采用的提取方法是除经典的热回流法、高速逆流色谱法以及超声提取法等相关技术,在质量评价中主要用指纹图谱法以及单指标质控这两种方法为主,并对延胡索体内动态进行研究,从现代化形势来看中药延胡索研究是很有意义的,为中药研究发展打下基础。
关键词:中药;延胡索;方法;化学成分;质量控制
中药延胡索本身是罂粟科紫堇属植物,是延胡索的块茎结构,别名为元胡、玄胡索以及玄胡等,主要的功效有活血、止痛、利气,通常用于治疗胸胁、经闭痛经、脘腹疼痛、跌扑肿痛等症状。延胡索是中国传统药物,在中医临床治疗中应用的比较多,还有很多西医临床治疗中也会应用到,其发挥的作用是非常大的。从现代化的中药发展形势来看,中药质量研究的重要性越来越被人们所关注,其占有的地位也呈现上升的趋势,尤其是对延胡索临床的药理作用以及临床应用效果进行分析和研究,更让中药的重要性凸显出来。
1 分析方法和化学成分
1.1 分析方法
对延胡索成分进行分析的时候,应用最多的就是热回流以及超声提取法这两种提取方法,而近些年普遍应用的是超临界流体萃取法、微波提取法以及高速逆流色谱法等相关提取方法,在分析延胡索成分的时候也有着较好的效果。
1.2 化学成分
经分析得出延胡索所含有的化学成分主要就是生物碱,其中有叔胺类生物碱以及季胺类生物碱,叔胺类生物碱含有量大概为0.65%,而季胺类生物碱含有量大概为0.30%。从统计数据中可以得知,延胡索中分离出来30多种生物碱,包括延胡索乙素、延胡索甲素、去氢延胡索甲素、小檗碱、氢化小檗碱、巴马打、d1-四氢黄连碱、黄连碱、L-四氢非洲防己碱、非洲防己碱、延胡索庚素、异紫董球-、元胡宁、L-四氢黄连碱等。
2 质量控制
生物碱的碱性有着强极性以及弱发挥性的特点,用常规的分析方法都是有较大困难的,即HPLC和GC分析法,单指标质控主要就是延胡索药材质量控制的特有模式,其主要质控指标就是其中的镇痛药效成分,采用的定量分析方法主要有高效液相色谱法、毛细管电泳法、液一致联用法以及薄层扫描法等一些方法。
2.1 高效液相色谱法
分离延胡索生物碱的过程中,应用反相液相色谱法去分离,其色谱柱是C18柱,甲醇水或者是乙腈水体系为流动相,并将磷酸盐缓冲液加入在其中,让分离效果有所改善,和HPLC方法相比主要的差别就是选择流动相不同。
2.2 薄层扫描法
测定中药有效成分的时候,应用较多的就是薄层扫描法,对延胡索进行测定也有着较高的准确性,而缺点就是测定过程比较繁琐而且测量时间会很长。用1%氢氧化钠硅胶薄层板以及环己烷为展开剂,测定出来的检测波长是441nm,的而参比波长是700nm,从结果中可以知道延胡索乙素线性良好的范围区间是在0.2g到1.0g之间。
2.3 高效毛细管电泳法
这种方法主要是对克心疼缓释片中含有的延胡索乙素成分进行测定,其运行缓冲液为磷酸盐甲醇,未涂层,毛细管柱内要进行多个峰分离。
2.4 液一致联用法
这种方法主要是分析和检定中药材成分分离,且应用的比较广泛,该方法主要是结合了液相色谱具有的高效分离能力,还有以质谱为检测器所具有的在线定性功能。比如对定元胡止疼软胶囊中所含有的延胡索乙素含量进行测量的时候,能够准确地确定延胡索乙素定量下限,让其灵敏度有所提高。
2.5 超临界流体萃取法
这种方法主要是用了超临界流体具有的高渗透性以及高溶解能力对对物质进行提取和分离,这种方法属于新型的提取分离技术,通常都是用于萃取低极性小分子化合物,要是萃取极性较大的化合物,比如生物碱和某些内酯等,在流体中可以应用醇类夹带剂。就像从延胡索中对延胡索乙素进行萃取可以用超临界流体萃取法,并和传统溶媒水以及甲醇提取法去比较,从而得出超临界流体萃取法要比传统溶媒提取法的萃取效果更好。
2.6 指纹图谱研究
指纹图谱技术已被广泛应用于中药品质鉴定与质量控制。相比较而言,HPLC因其分离效能高、选择性高、检测灵敏高、分析速度快、应用范围广等特点,在建立中药指纹图谱时常被选用或优先考虑。梁晶等采用RP-HPLC法建立了以延胡索乙素为内参照峰的延胡索药材HPLC指纹图谱,其中共含有17个共有色谱峰。詹汉英等建立了延胡索药材的RP-HPLC指纹图谱,采用“中药色谱指纹图谱相似度”软件研究了不同产地延胡索药材的质量差异,同时还建立了炮制与未炮制延胡索药材的指纹图谱,方法重现性好,可用于延胡索的质量评价和品种鉴别。
2.7 体内动态研究
目前国内外关于延胡索的药代动力学研究不多,仅有的文献也多以延胡索乙素为检测指标,本文作者曾研究了dl-延胡索乙素在大鼠体内的立体选择性动力学过程,用非手性-手性HPLC联用法测定大鼠血浆中对映体的浓度,发现两对映体在体内的药代动力学过程具有显著的立体选择性;采用大鼠在体小肠灌流实验和在体分离肠袢实验,研究延胡索乙素在大鼠小肠段的吸收动力学特征和立体选择性特征。谭成等通过碘标延胡索乙素探讨其在小鼠体内的分布代谢,结果发现延胡索乙素在体内主要经肝肾代谢,脂肪及脑内各区域也有较高分布。林力等应用LC-MS/MS方法建立了同时检测大鼠血浆中延胡索乙素THP和脱氢紫堇碱DHC的方法,并应用该法研究大鼠口服延胡索总生物碱后体内指标成分的药代动力学特征,结果发现THP在大鼠体内的AUC值与给药剂量呈正相关,DHC在体内达峰较快,表现分布容积较大,但AUC较小,吸收很差。
结束语
近年来有关延胡索的化学成分及分离提取、定量分析、指纹图谱和体内动态等方面的研究已取得一定的进展,化学成分主要是生物碱类,分离提取技术应用较多,质量评价以单指标质控的研究比较广泛,而指纹图谱和体内动态方面则是近几年来的研究热点。从大量的文献中可以发现,多数研究是针对药材中的单一成分延胡索乙素,针对原药材多成分的研究相对较少,并且进展有限。因此,应着力针对药材本身的化学、药理和质控进行研究,为更加深入地开发延胡索的药用价值,指导延胡索的临床应用提供参考依据。
参考文献
[1]王晓玲,郑振,洪战英,范国荣.中药延胡索的化学成分与质量控制研究進展[J].时珍国医国药,2011(1).
[2]王小莉.中药延胡索化学成分及质量控制探讨[J].中医中药,2012(7).
[3]蒋海强,容蓉,吕青涛.大黄化学成分的液相色谱-质谱联用鉴别[J].时珍国医国药,2011(7).
[4]姚元枝,伍贤进,黎晓英,虢慧,魏麟.接骨草的化学成分与药理活性研究进展[J].中成药,2015(12).
关键词:中药;延胡索;方法;化学成分;质量控制
中药延胡索本身是罂粟科紫堇属植物,是延胡索的块茎结构,别名为元胡、玄胡索以及玄胡等,主要的功效有活血、止痛、利气,通常用于治疗胸胁、经闭痛经、脘腹疼痛、跌扑肿痛等症状。延胡索是中国传统药物,在中医临床治疗中应用的比较多,还有很多西医临床治疗中也会应用到,其发挥的作用是非常大的。从现代化的中药发展形势来看,中药质量研究的重要性越来越被人们所关注,其占有的地位也呈现上升的趋势,尤其是对延胡索临床的药理作用以及临床应用效果进行分析和研究,更让中药的重要性凸显出来。
1 分析方法和化学成分
1.1 分析方法
对延胡索成分进行分析的时候,应用最多的就是热回流以及超声提取法这两种提取方法,而近些年普遍应用的是超临界流体萃取法、微波提取法以及高速逆流色谱法等相关提取方法,在分析延胡索成分的时候也有着较好的效果。
1.2 化学成分
经分析得出延胡索所含有的化学成分主要就是生物碱,其中有叔胺类生物碱以及季胺类生物碱,叔胺类生物碱含有量大概为0.65%,而季胺类生物碱含有量大概为0.30%。从统计数据中可以得知,延胡索中分离出来30多种生物碱,包括延胡索乙素、延胡索甲素、去氢延胡索甲素、小檗碱、氢化小檗碱、巴马打、d1-四氢黄连碱、黄连碱、L-四氢非洲防己碱、非洲防己碱、延胡索庚素、异紫董球-、元胡宁、L-四氢黄连碱等。
2 质量控制
生物碱的碱性有着强极性以及弱发挥性的特点,用常规的分析方法都是有较大困难的,即HPLC和GC分析法,单指标质控主要就是延胡索药材质量控制的特有模式,其主要质控指标就是其中的镇痛药效成分,采用的定量分析方法主要有高效液相色谱法、毛细管电泳法、液一致联用法以及薄层扫描法等一些方法。
2.1 高效液相色谱法
分离延胡索生物碱的过程中,应用反相液相色谱法去分离,其色谱柱是C18柱,甲醇水或者是乙腈水体系为流动相,并将磷酸盐缓冲液加入在其中,让分离效果有所改善,和HPLC方法相比主要的差别就是选择流动相不同。
2.2 薄层扫描法
测定中药有效成分的时候,应用较多的就是薄层扫描法,对延胡索进行测定也有着较高的准确性,而缺点就是测定过程比较繁琐而且测量时间会很长。用1%氢氧化钠硅胶薄层板以及环己烷为展开剂,测定出来的检测波长是441nm,的而参比波长是700nm,从结果中可以知道延胡索乙素线性良好的范围区间是在0.2g到1.0g之间。
2.3 高效毛细管电泳法
这种方法主要是对克心疼缓释片中含有的延胡索乙素成分进行测定,其运行缓冲液为磷酸盐甲醇,未涂层,毛细管柱内要进行多个峰分离。
2.4 液一致联用法
这种方法主要是分析和检定中药材成分分离,且应用的比较广泛,该方法主要是结合了液相色谱具有的高效分离能力,还有以质谱为检测器所具有的在线定性功能。比如对定元胡止疼软胶囊中所含有的延胡索乙素含量进行测量的时候,能够准确地确定延胡索乙素定量下限,让其灵敏度有所提高。
2.5 超临界流体萃取法
这种方法主要是用了超临界流体具有的高渗透性以及高溶解能力对对物质进行提取和分离,这种方法属于新型的提取分离技术,通常都是用于萃取低极性小分子化合物,要是萃取极性较大的化合物,比如生物碱和某些内酯等,在流体中可以应用醇类夹带剂。就像从延胡索中对延胡索乙素进行萃取可以用超临界流体萃取法,并和传统溶媒水以及甲醇提取法去比较,从而得出超临界流体萃取法要比传统溶媒提取法的萃取效果更好。
2.6 指纹图谱研究
指纹图谱技术已被广泛应用于中药品质鉴定与质量控制。相比较而言,HPLC因其分离效能高、选择性高、检测灵敏高、分析速度快、应用范围广等特点,在建立中药指纹图谱时常被选用或优先考虑。梁晶等采用RP-HPLC法建立了以延胡索乙素为内参照峰的延胡索药材HPLC指纹图谱,其中共含有17个共有色谱峰。詹汉英等建立了延胡索药材的RP-HPLC指纹图谱,采用“中药色谱指纹图谱相似度”软件研究了不同产地延胡索药材的质量差异,同时还建立了炮制与未炮制延胡索药材的指纹图谱,方法重现性好,可用于延胡索的质量评价和品种鉴别。
2.7 体内动态研究
目前国内外关于延胡索的药代动力学研究不多,仅有的文献也多以延胡索乙素为检测指标,本文作者曾研究了dl-延胡索乙素在大鼠体内的立体选择性动力学过程,用非手性-手性HPLC联用法测定大鼠血浆中对映体的浓度,发现两对映体在体内的药代动力学过程具有显著的立体选择性;采用大鼠在体小肠灌流实验和在体分离肠袢实验,研究延胡索乙素在大鼠小肠段的吸收动力学特征和立体选择性特征。谭成等通过碘标延胡索乙素探讨其在小鼠体内的分布代谢,结果发现延胡索乙素在体内主要经肝肾代谢,脂肪及脑内各区域也有较高分布。林力等应用LC-MS/MS方法建立了同时检测大鼠血浆中延胡索乙素THP和脱氢紫堇碱DHC的方法,并应用该法研究大鼠口服延胡索总生物碱后体内指标成分的药代动力学特征,结果发现THP在大鼠体内的AUC值与给药剂量呈正相关,DHC在体内达峰较快,表现分布容积较大,但AUC较小,吸收很差。
结束语
近年来有关延胡索的化学成分及分离提取、定量分析、指纹图谱和体内动态等方面的研究已取得一定的进展,化学成分主要是生物碱类,分离提取技术应用较多,质量评价以单指标质控的研究比较广泛,而指纹图谱和体内动态方面则是近几年来的研究热点。从大量的文献中可以发现,多数研究是针对药材中的单一成分延胡索乙素,针对原药材多成分的研究相对较少,并且进展有限。因此,应着力针对药材本身的化学、药理和质控进行研究,为更加深入地开发延胡索的药用价值,指导延胡索的临床应用提供参考依据。
参考文献
[1]王晓玲,郑振,洪战英,范国荣.中药延胡索的化学成分与质量控制研究進展[J].时珍国医国药,2011(1).
[2]王小莉.中药延胡索化学成分及质量控制探讨[J].中医中药,2012(7).
[3]蒋海强,容蓉,吕青涛.大黄化学成分的液相色谱-质谱联用鉴别[J].时珍国医国药,2011(7).
[4]姚元枝,伍贤进,黎晓英,虢慧,魏麟.接骨草的化学成分与药理活性研究进展[J].中成药,2015(12).