【摘 要】
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研究β-内酰胺酶催化水解青霉素G钾动力学,用毛细管区带电泳法检测青霉素G钾含量,采用动力学方法考察了反应时间、p H和温度对β-内酰胺酶水解活性和稳定性的影响,并计算一定
【机 构】
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浙江农林大学浙江省林业生物质化学利用重点实验室,杭州市余杭区环境监测站,
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研究β-内酰胺酶催化水解青霉素G钾动力学,用毛细管区带电泳法检测青霉素G钾含量,采用动力学方法考察了反应时间、p H和温度对β-内酰胺酶水解活性和稳定性的影响,并计算一定条件下的动力学参数。结果表明,升高反应温度β-内酰胺酶与底物的亲和力和催化水解的效率逐渐增大,但过高温使酶失活,酶和底物的亲和力和催化效率均迅速降低;p H大小影响β-内酰胺酶中间络合物转变为产物的效率;通过动力学参数计算确定β-内酰胺酶催化水解青霉素G钾的最佳条件为p H8.41、温度40℃,在此条件下水解速率常数越大,β-内酰胺酶水解能力越强,最适条件下β-内酰胺酶的转化率kcat和反应的活化能Ea为29.7 s-1、3186.26 J/mol。
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