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目的
探讨衣原体噬菌体phiCPG1衣壳蛋白Vp1蛋白IN5部分在Vp1抑制沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)生长过程中的作用。
方法以Vp1质粒为模板,PCR扩增IN5环基因片段,构建重组质粒pET28a/IN5,转化后诱导表达鉴定,收集纯化的IN5蛋白。将IN5蛋白、Vp1蛋白及各对照组作用于Ct培养过程中,48 h后碘染色及间接免疫荧光进行包涵体计数,采用单因素方差分析比较各组间包涵体均数的差异,若各组均数间差异有统计学意义,采用Bonferroni法对任两个均数进行比较,最后计算IN5蛋白和Vp1蛋白对Ct的抑制率。
结果成功地诱导表达出Vp1蛋白的IN5部分,并发现在浓度均为53 μg/mL时,IN5蛋白对Ct的抑制率为52.42%,而Vp1的抑制率为78.04%。
结论IN5蛋白同样对Ct生长有抑制作用,但较Vp1弱,这为寻找Vp1蛋白抑制Ct生长的优势蛋白区域提供了初步探索的经验。