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目的
探讨羟基红花黄色素A（Hydroxysafflor yellow A，HSYA）在β-甘油磷酸钠（β-GP）诱导的血管平滑肌细胞（VSMC）钙化过程中的作用及其机制。
方法VSMC用10%胎牛血清+1%双抗高糖DMEM培养液，于37℃、5%CO2培养箱中培养，根据细胞生长密度按1∶4比例传代。实验分为3组：对照组（NC）、高磷诱导钙化组（HP）、HSYA干预组（HSYA）。用茜素红染色和钙测定试剂盒（邻甲酚酞络合酮比色法）检测各组细胞钙沉积量；Western印迹法检测细胞钙化指标碱性磷酸酶（ALP），Runt相关转录因子2（RUNX2），核因子κB受体活化因子配体（RANKL），α平滑肌肌动蛋白（α-SMA），及TLR4/NF-κB通路和炎性反应相关指标Toll样受体4（TLR4），白细胞介素8（IL-8），肿瘤坏死因子α（TNF-α）的变化。抽提细胞核蛋白和细胞质蛋白，Western印迹法检测细胞核NF-κB p65和细胞质p65，及细胞总蛋白中p65和磷酸化p65的改变。超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）试剂盒法检测细胞抗氧化酶和氧化终产物的改变。
结果Western印迹结果显示，HSYA组细胞钙化指标ALP、RUNX2、RANKL的表达量较HP组明显减少；α-SMA表达较HP组增加（均P<0.01）。HSYA组TLR4、TNF-α、IL-8和p-p65/p65的表达量较HP组减少，p65入核减少，细胞质内p65的表达增多（均P<0.05）。HSYA组细胞SOD含量较HP组明显升高，MDA含量较HP组明显降低（均P<0.01）。
结论羟基红花黄色素A可减轻高磷诱导的血管平滑肌细胞的钙化，减少钙沉积。其机制与羟基红花黄色素A抑制了TLR4/NF-κB通路的激活和氧化应激反应有关。