【摘 要】
：
目的 制备一种新型的肺癌靶向通用载体hu3D3与核心链霉亲和素(core-streptavidin,cSA)的融合蛋白hu3D3/cSA,并鉴定其活性.方法 PCR扩增cSA基因,克隆至质粒hu3D3/pET-22b(+)而
【机 构】
：
厦门大学生命科学学院,厦门大学医学院抗癌研究中心
论文部分内容阅读
目的 制备一种新型的肺癌靶向通用载体hu3D3与核心链霉亲和素(core-streptavidin,cSA)的融合蛋白hu3D3/cSA,并鉴定其活性.方法 PCR扩增cSA基因,克隆至质粒hu3D3/pET-22b(+)而获得表达载体hu3D3/cSA/pET-22b(+),并在E. coli BL21(DE3)中表达,镍亲和层析柱纯化hu3D3/cSA融合蛋白,采用TEA缓冲液进行复性.SDS-PAGE和Western blot鉴定融合蛋白四聚体的形成.FITC标记hu3D3/cSA,通过荧光显微镜分析hu3D3组分的抗原反应性和特异性,流式细胞术比较hu3D3/cSA和hu3D3与靶点的结合能力;ELISA和Western blot鉴定cSA组分结合生物素(biotin)的能力.结果 获得序列正确的hu3D3/cSA/pET-22b(+)重组子,融合基因在E.coli BL21(DE3)中主要以包涵体的形式表达.纯化复性后的融合蛋白能够形成四聚体复合物,保留了cSA结合生物素的活性,hu3D3组分能与肺癌细胞表面抗原结合,且结合能力与单体hu3D3相比有明显增强.结论 成功制备了具有结合靶抗原和生物素活性的hu3D3/cSA融合蛋白,同时改善了hu3D3组分结合其靶点的亲合力(avidity).因此,hu3D3/cSA可以作为一个通用的肺癌靶向载体,与多种生物素化的抗肿瘤药物或试剂联用,有望为多药物联合靶向治疗肺癌提供一种可行的方法.
其他文献
煤炭对于国民经济的发展具有十分重要的作用,在煤炭生产是一个高风险的行业,稍有不甚,就有可能发生不可挽回的灾难,造成生命和财产损失,影响煤炭供应,不利于经济的发展.煤矿
随着知识经济的发展,人力资源管理的职能将产生重大的变化,主要以人力资本投资为核心,为企业做人员管理的决策并提供战略性的信息。人力资源管理将成为企业管理的核心内容。
作为老师,我们都会要求学生要学习勤奋,甚至有时我们会要求学生少玩一会,多看一会书,多做几道题.要求学生勤奋是必要的,但是挤占学生休息、玩乐的时间却是不科学的做法.我们
在日常教学工作中发现,有些学生由于自身的不成熟,以及来自家庭社会种种不良因素的影响,心理上形成了不健康的因素.这些不健康的因素,影响了他们的生活和学习.如果家庭、学校
目的 将重组腺病毒介导的mda-7/IL-24(melanoma differentiation-associated gene-7)与阿霉素(adriamycin,ADM)联合治疗裸鼠肝癌,探索基因治疗和化疗相结合治疗肿瘤的新方法.
目的 探讨口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinomas,OSCC)染色体不稳定形成的潜在机制.方法 采用间接免疫荧光染色法观察8例正常口腔黏膜及32例OSCC石蜡包埋组织的中心
近年来,有研究表明基质细胞衍生因子1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)和其受体CXCR4(SDF-1/CXCR4)轴在干细胞的增殖分化中起至关重要的作用[1].本研究采用2-乙酰氨基
目的 研究中国湖南地区人偏肺病毒(hMPV)的基因分型及其膜蛋白G序列的遗传学特征,比较分析其区域性流行特点.方法收集2005年中国湖南地区232份住院儿童鼻咽抽吸物(NPA)样本进
目的 利用双源CT全时相间隔重建并Inspace软件中的四维(4D)模式,评价双源CT对冠状动脉的多时相成像能力,并探讨冠状动脉CT成像(CTA)的质量随时相变化的规律及其形成原因.方法
目的 研究不同剂量6%羟乙基淀粉130/0.4(6% HES 130/0.4)预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响.方法 72只健康清洁级雄性SD大鼠随机分为6组(n=12),对照组(C组)经尾静脉注