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【摘 要】目的：本实验是为了客观科学地评价山东某生物制药有限公司提供的虫草多糖溶液、虫草多糖+云芝多糖+猴头菇多糖混合溶液、猴头菇多糖溶液对酒精性肝损伤的保护效果。方法：通过成功建立小白鼠连续诱发酒精性肝损伤模型，用以上三种解酒中药进行连续30天饮服给药，在第10、20和30天时采样进行ALT、AST和病理组织学观察。结果：在连续灌服白酒早期，虫草多糖+云芝多糖+猴头菇多糖混合溶液的保肝作用优于虫草多糖溶液和猴头菇多糖溶液。结论：随着给药时间的延长，三种中药均有很好的保肝作用。
【关键词】酒精性肝损伤；ALT；AST；组织病理学检查
【中图分类号】R285 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2013）10—0001—01
大量酒精摄入后可引起机体多系统损害，肝脏是酒精代谢的主要脏器。因此研制出有效的解酒护肝药物进行防治尤显重要。反映肝细胞损伤的试验很多，较常用的有血清酶（谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST））的测定和组织病理学检查。病理学改变主要为大泡性或大泡性为主伴小泡性的混合性肝细胞脂肪变性。因此我们也可根据这些指标值和病变来评价药物对酒精性肝损伤的保护作用。
本实验是为了客观科学地评价山东某生物制药有限公司提供的虫草多糖溶液、虫草多糖+云芝多糖+猴头菇多糖混合溶液、猴头菇多糖溶液对酒精性肝损伤的保护效果。通过成功建立小白鼠连续诱发酒精性肝损伤模型，用以上三种解酒中药进行连续30天饮服给药，在第10、20和30天时采样进行ALT、AST和检测及病理组织学观察，评价了三种解酒中药溶液对酒精性肝损伤的防治效果。
1材料与方法
1.1动物分组与处理
三种解酒中药溶液，由山东华农生物制药有限公司提供，分别标示为A、B和C。A为虫草多糖溶液；B为虫草多糖+云芝多糖+猴头菇多糖混合溶液；C为猴头菇多糖溶液。56°北京红星二锅头酒，市售。选取健康♂小白鼠，120只，体重22～28g，适应饲养1周。随机分为5组：A、B、C三个解酒中药组、白酒灌胃组和正常组。见表1。将中药原液用蒸馏水分别稀释成1%溶液（即每1mL含10mg
药量），按每只鼠每天0.5mg药量饮服。
1.2 试验方法
1.2.1 诱发酒精性肝损伤模型 将56°北京红星二锅头酒用蒸馏水配制成含酒精40% （v/v）的白酒备用。除正常组外，各组在第一周均按9mL/kg灌胃，从第二周起至第30天白酒灌胃量减半（4.5mL/kg），每日上午9：00～10：00间灌胃一次。
1.2.2 采样与测定 在试验第10、20和30天时，每组随机选择6只小白鼠处死，采集血液1～2mL（制备血清）和肝脏组织。肝组织在0～4℃下用玻璃匀浆器研磨，10000rpm离心10min，取上清液与血清一起于-20℃保存备用。按生化检测仪和试剂盒说明书测定。
所有试验组在第15、30天时各组取2只鼠的肝脏进行病理切片检查。
2 结果与分析
2.1 中药溶液对酒精性肝损伤小白鼠血清的AST和ALT的影响
试验第10天时，各组小白鼠血清的AST（天门冬氨酸氨基转移酶）和ALT（丙氨酸氨基转移酶）的结果显示，与正常组比较，白酒灌胃组和A、C中药组的AST显著升高（p<0.05），而中药B组AST虽有升高，但明显低于其他试验组，表明在第10天时，中药B组在降低酒精性肝损伤的血清AST指标上优于中药A和C。在血清ALT方面，中药B组对降低ALT指标亦优于中药A和C。试验第20天时，监测各组小白鼠血清的AST和ALT。在试验第20天时，结果显示，中药B组对降低血清AST和ALT两方面均优于中药A和C。中药A效果较差。试验第30天时，监测各组小白鼠血清的AST和ALT。试验第30天时，随着给药时间的延长，中药A、B、C均表现良好的降低血清AST和ALT作用，其中中药B与C相近，而中药A效果较差。
2.2 病理组织学检查结果
在试验第15、30天时，各组任取2只小白鼠肝脏进行病理切片检查结果
第15天：
中药A组：肝脏未见结缔组织增生，肝细胞胞核清晰，未见明显退行性变化及坏死；未见明显出血、淤血等；未见明显炎症细胞浸润及其它炎症变化；未见细胞实质细胞异常增殖、未见肿瘤性病变。
中药B组：肝脏组织结构较清晰，未见结缔组织增生；肝细胞轻度肿胀，呈轻微颗粒变性，未见坏死；脉管结构清晰，未见明显出血、淤血等；未见明显炎症细胞浸润；未见细胞实质细胞异常增殖、未见肿瘤性病变。
中药C组：肝细胞肿胀，肝细胞明显颗粒变性，少数细胞可见坏死；中央静脉，肝血窦动脉等脉管结构清晰；汇管区小静脉可见淤血等血液学改变；未见明显炎症细胞浸润，未见其它炎症变化；未见细胞实质细胞异常增殖、未见肿瘤性病变。
白酒灌胃组：肝脏组织不明显，肝细胞严重肿胀，肝细胞明显颗粒变性，水泡变性、可见坏死。
正常组：未见结缔组织增生、未见明显出血、淤血等血液学改变；未见明显炎症细胞浸润；未见细胞实质细胞异常增殖、未见肿瘤性病变。
第30天：
中药A组：未见明显退行性变化及坏死；未见明显出血、淤血等血液学改变；未见明显炎症细胞浸润，未见其它炎症变化；未见细胞实质细胞异常增殖、未见肿瘤性病变。
中药B 组：肝脏小叶间可见少量结缔组织，未见结缔组织增生；肝细胞轻度肿胀，呈轻微颗粒变性，未见坏死；未见明显炎症细胞浸润，未见其它炎症变化；未见细胞实质细胞异常增殖、未见肿瘤性病变。
中药C组：肝脏小叶间可见少量结缔组织，未见结缔组织增生；肝细胞轻度颗粒变性及空泡变性，未见明显出血、淤血等血液学改变；未见明显炎症细胞浸润，未见其它炎症变化；未见细胞实质细胞异常增殖、未见肿瘤性病变。
白酒灌胃组：肝脏组织呈不规则小叶结构，小叶间可见少量结缔组织，未见结缔组织增生；肝细胞重度肿胀，肝细胞明显颗粒变性，少数细胞可见坏死。
正常组：未见明显退行性变化及坏死；未见明显出血、淤血等，未见明显炎症细胞浸润，未见其它炎症变化，
3 讨论
3.1 AST和ALT是反映肝功能的两种重要酶，它们含量上升越高表示肝功能受损越严重。本试验前20天中，中药B的保肝作用明显优于中药A和C。随着给药时间的延长，中药B与C效果相近，而中药A效果较差。
3.2 本试验综合评价表明：在连续灌服白酒早期，虫草多糖+云芝多糖+猴头菇多糖混合溶液的保肝作用优于虫草多糖溶液和猴头菇多糖溶液。随着给药时间的延长，三者均有很好的保肝作用。
参考文獻：
[1] 龚晓健，季晖，卢顺高. 2010. 人工虫草多糖对小鼠免疫功能的影响.中国药科大学学报，31（1）：53～5
[2] 徐航民，谢志慧，张蔚羽等. 2009. 猴头菇多糖的免疫调节作用. 中国中西医结合杂志，14（7）：427-428
[3] 廖胜东. 2000. 肝病患者部分酶学和指血18项指标检测的临床意义. 临床荟萃，12（12）：537～539
[4] 吴齤荪. 1998. 自由基与临床医学微循环学杂志，8（4）：24-26
[5] 杨牧祥，田元祥，姚树坤等. 2002. 解酒护肝饮对酒精性肝损伤大鼠血清和肝组织ALT、AST的影响. 河北中医，22（10）：793～796
【关键词】酒精性肝损伤；ALT；AST；组织病理学检查
【中图分类号】R285 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2013）10—0001—01
大量酒精摄入后可引起机体多系统损害，肝脏是酒精代谢的主要脏器。因此研制出有效的解酒护肝药物进行防治尤显重要。反映肝细胞损伤的试验很多，较常用的有血清酶（谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST））的测定和组织病理学检查。病理学改变主要为大泡性或大泡性为主伴小泡性的混合性肝细胞脂肪变性。因此我们也可根据这些指标值和病变来评价药物对酒精性肝损伤的保护作用。
本实验是为了客观科学地评价山东某生物制药有限公司提供的虫草多糖溶液、虫草多糖+云芝多糖+猴头菇多糖混合溶液、猴头菇多糖溶液对酒精性肝损伤的保护效果。通过成功建立小白鼠连续诱发酒精性肝损伤模型，用以上三种解酒中药进行连续30天饮服给药，在第10、20和30天时采样进行ALT、AST和检测及病理组织学观察，评价了三种解酒中药溶液对酒精性肝损伤的防治效果。
1材料与方法
1.1动物分组与处理
三种解酒中药溶液，由山东华农生物制药有限公司提供，分别标示为A、B和C。A为虫草多糖溶液；B为虫草多糖+云芝多糖+猴头菇多糖混合溶液；C为猴头菇多糖溶液。56°北京红星二锅头酒，市售。选取健康♂小白鼠，120只，体重22～28g，适应饲养1周。随机分为5组：A、B、C三个解酒中药组、白酒灌胃组和正常组。见表1。将中药原液用蒸馏水分别稀释成1%溶液（即每1mL含10mg
药量），按每只鼠每天0.5mg药量饮服。
1.2 试验方法
1.2.1 诱发酒精性肝损伤模型 将56°北京红星二锅头酒用蒸馏水配制成含酒精40% （v/v）的白酒备用。除正常组外，各组在第一周均按9mL/kg灌胃，从第二周起至第30天白酒灌胃量减半（4.5mL/kg），每日上午9：00～10：00间灌胃一次。
1.2.2 采样与测定 在试验第10、20和30天时，每组随机选择6只小白鼠处死，采集血液1～2mL（制备血清）和肝脏组织。肝组织在0～4℃下用玻璃匀浆器研磨，10000rpm离心10min，取上清液与血清一起于-20℃保存备用。按生化检测仪和试剂盒说明书测定。
所有试验组在第15、30天时各组取2只鼠的肝脏进行病理切片检查。
2 结果与分析
2.1 中药溶液对酒精性肝损伤小白鼠血清的AST和ALT的影响
试验第10天时，各组小白鼠血清的AST（天门冬氨酸氨基转移酶）和ALT（丙氨酸氨基转移酶）的结果显示，与正常组比较，白酒灌胃组和A、C中药组的AST显著升高（p<0.05），而中药B组AST虽有升高，但明显低于其他试验组，表明在第10天时，中药B组在降低酒精性肝损伤的血清AST指标上优于中药A和C。在血清ALT方面，中药B组对降低ALT指标亦优于中药A和C。试验第20天时，监测各组小白鼠血清的AST和ALT。在试验第20天时，结果显示，中药B组对降低血清AST和ALT两方面均优于中药A和C。中药A效果较差。试验第30天时，监测各组小白鼠血清的AST和ALT。试验第30天时，随着给药时间的延长，中药A、B、C均表现良好的降低血清AST和ALT作用，其中中药B与C相近，而中药A效果较差。
2.2 病理组织学检查结果
在试验第15、30天时，各组任取2只小白鼠肝脏进行病理切片检查结果
第15天：
中药A组：肝脏未见结缔组织增生，肝细胞胞核清晰，未见明显退行性变化及坏死；未见明显出血、淤血等；未见明显炎症细胞浸润及其它炎症变化；未见细胞实质细胞异常增殖、未见肿瘤性病变。
中药B组：肝脏组织结构较清晰，未见结缔组织增生；肝细胞轻度肿胀，呈轻微颗粒变性，未见坏死；脉管结构清晰，未见明显出血、淤血等；未见明显炎症细胞浸润；未见细胞实质细胞异常增殖、未见肿瘤性病变。
中药C组：肝细胞肿胀，肝细胞明显颗粒变性，少数细胞可见坏死；中央静脉，肝血窦动脉等脉管结构清晰；汇管区小静脉可见淤血等血液学改变；未见明显炎症细胞浸润，未见其它炎症变化；未见细胞实质细胞异常增殖、未见肿瘤性病变。
白酒灌胃组：肝脏组织不明显，肝细胞严重肿胀，肝细胞明显颗粒变性，水泡变性、可见坏死。
正常组：未见结缔组织增生、未见明显出血、淤血等血液学改变；未见明显炎症细胞浸润；未见细胞实质细胞异常增殖、未见肿瘤性病变。
第30天：
中药A组：未见明显退行性变化及坏死；未见明显出血、淤血等血液学改变；未见明显炎症细胞浸润，未见其它炎症变化；未见细胞实质细胞异常增殖、未见肿瘤性病变。
中药B 组：肝脏小叶间可见少量结缔组织，未见结缔组织增生；肝细胞轻度肿胀，呈轻微颗粒变性，未见坏死；未见明显炎症细胞浸润，未见其它炎症变化；未见细胞实质细胞异常增殖、未见肿瘤性病变。
中药C组：肝脏小叶间可见少量结缔组织，未见结缔组织增生；肝细胞轻度颗粒变性及空泡变性，未见明显出血、淤血等血液学改变；未见明显炎症细胞浸润，未见其它炎症变化；未见细胞实质细胞异常增殖、未见肿瘤性病变。
白酒灌胃组：肝脏组织呈不规则小叶结构，小叶间可见少量结缔组织，未见结缔组织增生；肝细胞重度肿胀，肝细胞明显颗粒变性，少数细胞可见坏死。
正常组：未见明显退行性变化及坏死；未见明显出血、淤血等，未见明显炎症细胞浸润，未见其它炎症变化，
3 讨论
3.1 AST和ALT是反映肝功能的两种重要酶，它们含量上升越高表示肝功能受损越严重。本试验前20天中，中药B的保肝作用明显优于中药A和C。随着给药时间的延长，中药B与C效果相近，而中药A效果较差。
3.2 本试验综合评价表明：在连续灌服白酒早期，虫草多糖+云芝多糖+猴头菇多糖混合溶液的保肝作用优于虫草多糖溶液和猴头菇多糖溶液。随着给药时间的延长，三者均有很好的保肝作用。
参考文獻：
[1] 龚晓健，季晖，卢顺高. 2010. 人工虫草多糖对小鼠免疫功能的影响.中国药科大学学报，31（1）：53～5
[2] 徐航民，谢志慧，张蔚羽等. 2009. 猴头菇多糖的免疫调节作用. 中国中西医结合杂志，14（7）：427-428
[3] 廖胜东. 2000. 肝病患者部分酶学和指血18项指标检测的临床意义. 临床荟萃，12（12）：537～539
[4] 吴齤荪. 1998. 自由基与临床医学微循环学杂志，8（4）：24-26
[5] 杨牧祥，田元祥，姚树坤等. 2002. 解酒护肝饮对酒精性肝损伤大鼠血清和肝组织ALT、AST的影响. 河北中医，22（10）：793～796