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目的
观察沉默环氧合酶2(COX-2)基因对人骨肉瘤细胞SaOS2生长及转移的影响。
方法利用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默人骨肉瘤细胞SaOS2中内源性COX-2基因的表达,应用MTT和迁移实验等分别检测COX-2沉默对SaOS2增殖能力、迁移能力的影响;应用实时聚合酶链反应和免疫印迹检测COX-2、血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子(EGF)、成纤维细胞生长因子(bFGF)的mRNA和蛋白表达水平。
结果转染LV-COX-2siRNA-1沉默COX-2后,SaOS2细胞生长受到了明显的抑制,直接降低了SaOS2细胞的迁移率;并能显著抑制VEGFA, EGF和bFGF的表达,而VEGFB和VEGFC的含量没有明显变化。
结论RNA沉默人骨肉瘤中COX-2的表达能显著抑制SaOS2细胞的生长,降低其转移能力,并能下调VEGF、EGF和bFGF的mRNA和蛋白质的表达水平。