【摘 要】
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目的观察结合于骨桥蛋白(OPN)mRNA上低自由能区域的反义寡脱氧核苷酸(ASODN)对OPN基因的抑制效应,以及对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞体外增殖和凋亡的影响。方法基于最小自由能
【机 构】
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西北民族大学医学院,甘肃省中医学院,兰州大学基础医学院,兰州大学生命科学学院,甘肃省商业科技研究所
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目的观察结合于骨桥蛋白(OPN)mRNA上低自由能区域的反义寡脱氧核苷酸(ASODN)对OPN基因的抑制效应,以及对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞体外增殖和凋亡的影响。方法基于最小自由能算法,针对OPN mRNA上的低结合自由能区域设计合成ASODN,转染高表达OPN的人乳腺癌细胞系MCF-7;MTT法测定细胞增殖抑制率;电子显微镜下观察细胞形态学改变;RT-PCR检测OPN mRNA水平;流式细胞术检测细胞周期及凋亡发生率。结果OPN ASODN呈时间和剂量依赖性抑制MCF-7细胞增殖(P<0.05);经16μmol/L OPN ASODN作用72h,细胞呈典型凋亡特征;OPN mRNA表达水平下降;反义组凋亡细胞比例显著升高(P<0.01)。结论OPN ASODN在体外可抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖并诱导其发生凋亡;利用最小自由能原理来设计反义寡核苷酸是一种较为可靠的方法。
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