【摘 要】
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[目的]为了弄清传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)诱导肿瘤细胞发生自噬的特性,以及在自噬期间是否会增强自身复制能力.[方法]利用IBDV对人乳腺癌细胞系(Michigan Cancer Foundation,MCF-7)进行侵染,采用透射电镜技术观察自噬体的形成,免疫荧光手段检测微管蛋白1轻链3(LC3)的表达,以及空斑分析法测定病毒滴度与绝对定量法扩增VP2基因判定病毒复制水平.[结果]在IBDV感染8 h后,观察到双层膜结构的自噬体.12 h
【机 构】
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农业微生物技术教育部工程研究中心,黑龙江哈尔滨150500;黑龙江大学生命科学学院,微生物省高校重点实验室,黑龙江哈尔滨150080;农业微生物技术教育部工程研究中心,黑龙江哈尔滨150500;黑龙江
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[目的]为了弄清传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)诱导肿瘤细胞发生自噬的特性,以及在自噬期间是否会增强自身复制能力.[方法]利用IBDV对人乳腺癌细胞系(Michigan Cancer Foundation,MCF-7)进行侵染,采用透射电镜技术观察自噬体的形成,免疫荧光手段检测微管蛋白1轻链3(LC3)的表达,以及空斑分析法测定病毒滴度与绝对定量法扩增VP2基因判定病毒复制水平.[结果]在IBDV感染8 h后,观察到双层膜结构的自噬体.12 h后,LC3的表达量大幅增加,添加CQ后绿色荧光蛋白明显大幅减少.在2～48h之间IBDV病毒滴度逐渐增加,添加Rapa后病毒滴度显著增加(P＜0.05),添加CQ后,病毒滴度与IBDV刺激组相比显著降低(P＜0.05).[结论]表明IBDV能够成功诱导MCF-7细胞发生自噬进而促进病毒复制.
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[目的]在转录水平上分别研究猪粪和树叶为基质的沼气干发酵过程中古菌与细菌的类群演替规律,以及甲烷合成关键酶基因mcrA和16S rRNA基因的丰度变化.[方法]通过Barcoded高通量测序获取沼气发酵原核微生物群落组成,利用定量PCR技术获得mcrA和16S rRNA基因丰度,通过皮尔森(Person)指数的计算,分析发酵系统中各微生物类群间的相关性.[结果]猪粪发酵过程细菌和古菌优势类群分别为严格梭菌属(Clostridium sensu strictol,在不同发酵时期的细菌群落结构占比17％～29
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