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目的观察由卡介苗(简称BCG)和结核分枝杆菌国际标准无毒株H37Ra(简称H37Ra菌株)为亲本菌株构建的融合菌株(简称B/R菌株)接种C57BL/6小鼠后在小鼠体内的毒性及其安全性。方法将204只C57BL/6小鼠随机分为生理盐水组(36只)、BCG组(56只)、B/R组(56只)和H37Ra组(56只);分别皮内接种无菌生理盐水、BCG菌悬液、B/R菌株菌悬液、H37Ra菌株菌悬液0.1ml(含活菌数为1.0×106个),观察各组小鼠生存基本情况并记录接种后第3、6、9、12、15、18周小鼠体重;分别于接种后第2、3、6、9、12周取BCG组、B/R组、H37Ra组小鼠各4只,处死后摘取小鼠完整肺脏和脾脏称重后分别制成脏器组织匀浆,接种于罗氏培养基培养20d,计数各脏器菌落数(CFU);分别于接种后第3、6、9、12、15、18周,四组分别随机各取6只小鼠,脱颈处死后称取体重,摘取小鼠肺脏及脾脏在组织固定液中固定(固定前脾脏称重),48h后制作病理切片,HE染色后观察小鼠肺脏、脾脏的病理变化,并计算各组小鼠各时间点的脾脏系数。结果 (1)4组小鼠接种后一般生存状态良好,接种部位未出现明显溃疡、脓疱等。从接种后第1d~18周各组小鼠均无死亡,生存率为100%。接种后第3周、6周,四组之间小鼠体重相比差异无统计学意义(P>0.05),接种后第9周、15周,H37Ra组小鼠体重低于生理盐水组(P<0.05),接种后第12周,BCG组小鼠体重低于生理盐水组(P<0.05),接种后第18周,H37Ra组小鼠体重分别与生理盐水组、BCG组、B/R组相比均降低(P<0.05);(2)接种后第2周、3周、6周时小鼠脾脏定植细菌数(Log10cfu),H37Ra组、B/R组均较BCG组升高(P<0.05);B/R组与H37Ra组比较差异无统计学意义(P>0.05)。接种后第9周小鼠脾脏定植菌数(Log10cfu),H37Ra组较BCG组升高(P<0.05),B/R组分别与H37Ra组、BCG组相比差异无统计学意义(P>0.05)。接种后第12周小鼠脾脏定植细菌数(Log10cfu),H37Ra组、B/R组均较BCG组升高(P<0.05),B/R组较H37Ra组降低(P<0.05)。(3)在接种后第2周小鼠肺脏定植菌数(Log10cfu),B/R组较BCG组升高(P<0.05);B/R组、BCG组分别于H37Ra组相比差异无统计学意义(P>0.05)。接种后第3周三组小鼠肺脏定植菌数(Log10cfu)之间相比差异无统计学意义(P>0.05);接种后第6周小鼠肺脏定植菌数(Log10cfu),H37Ra组较BCG组升高(P<0.05),B/R组分别与H37Ra组、BCG组相比差异无统计学意义(P>0.05);接种后第9周小鼠肺脏定植菌数(Log10cfu),H37Ra组较BCG组升高(P<0.05);B/R组较H37Ra组降低(P<0.05),B/R组与BCG组相比差异无统计学意义(P>0.05);接种后第12周小鼠肺脏定植菌数(Log10cfu),B/R组、H37Ra组均较BCG组升高(P<0.05),B/R组与H37Ra组相比差异无统计学意义(P>0.05);(4)各时间点生理盐水组小鼠肺脏、脾脏均呈现正常病理征象。接种后第3~18周BCG组、H37Ra组及B/R组小鼠肺脏均表现出不同程度的炎细胞浸润和气道上皮细胞局部脱失,肺泡间隔增宽,部分肺间质水肿,但肺泡腔无改变,均未出现结核结节,第3~18周BCG组、H37Ra组和B/R组小鼠脾脏均有不同程度白髓比例升高,淋巴小结体积增大,动脉周围淋巴鞘增厚;红髓扩张淤血,巨噬细胞增多等改变;(5)接种后第3周、6周小鼠脾脏系数,BCG组、H37Ra组及B/R组均较生理盐水组明显升高(P<0.05);接种后第9周小鼠脾脏系数,H37Ra组及B/R组均较生理盐水组明显升高(P<0.05),BCG组与生理盐水组相比差异无统计学意义(P>0.05),接种后第12周小鼠脾脏系数,H37Ra组较生理盐水组显著升高(P<0.01),B/R组较生理盐水组升高(P<0.05);BCG组较H37Ra组降低(P<0.05)。接种后第15周、18周四组小鼠脾脏系数之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 B/R菌株的毒性较H37Ra菌株降低,与卡介苗相当,其使用安全性较好。