【摘 要】
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目的 对人脐带Wharton胶间质干细胞(human umbilical cord Whartons Jelly-derived MSC,hWJMSC)进行免疫特性的体外和体内研究,探讨其应用于临床的可行性.方法 取人脐带并分
【基金项目】
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国家自然科学基金;解放军总医院科技创新苗圃基金
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目的 对人脐带Wharton胶间质干细胞(human umbilical cord Whartons Jelly-derived MSC,hWJMSC)进行免疫特性的体外和体内研究,探讨其应用于临床的可行性.方法 取人脐带并分离Wharton胶,组织块法培养hWJMSC,通过细胞表面干细胞标志和多向分化实验对其进行鉴定;通过流式细胞术、免疫组织化学及RT-PCR等实验方法体外检测hWJMSC的主要组织相容性抗原(HLA-ABC和HLA-DPDQDR,即MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ)、表面共刺激分子(CD40、CD80、CD86)和免疫抑制分子(HLAC、IDO、PGE2)等的表达;通过细胞因子蛋白芯片和Western blot实验检测并验证hWJMSC中与免疫抑制相关的细胞因子(IL-10、TGF-β、VEGF、HGF)的表达;另外,还构建了hWJMSC-支架复合体,将其埋人家兔背部皮下,观察其在体内的免疫反应.结果 从人脐带Wharton胶中分离、培养获得长梭形细胞,经流式细胞术及多向分化实验鉴定其为间质干细胞;流式细胞术及免疫组化等检测显示所分离的hWJMSC不表达MHC-Ⅱ,表达MHC-Ⅰ,阳性表达免疫抑制因子HLA-G、IDO、PGE2以及免疫抑制相关细胞因子IL-10、TGF-β、VEGF、HGF,表明其具有低免疫原性和诱导免疫耐受的能力;hWJMSC-支架埋人家兔皮下未引起免疫反应.结论 hWJMSC的免疫原性低,具有抑制免疫排斥、诱导宿主免疫耐受的能力,可应用于异体移植.
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