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摘要[目的]探讨厚朴种源间、种源内家系及家系内个体间的遗传多样性，为厚朴良种选育提供理论依据。[方法]采用AFLP分子标记技术，分析来自湖北、广西和浙江的厚朴种源间、半同胞家系间及家系内单株间的遗传多样性。[结果]3个种源材料遗传距离为0048 2～0.128 4，广西资源和浙江景宁2个群体相似性较高。种群遗传多样性平均水平、总种群基因多样度、基因流分别为0.203 5、0.254 1、3.421 7。观测等位基因数和有效等位基因数平均数分别为1.658 3和1.341 4；Nei’s基因多样性和Shannon多样性指数均值分别为0.203 5和0.308 7，其中湖北五峰的遗传多样性水平最高（为0.225 8），浙江景宁遗传多样性水平最低（为0.173 9）。湖北五峰、广西资源、浙江景宁家系内遗传多样性分别为0.264 4、0.181 9、0.173 8，Shannon多样性指数为0.415 4。[结论]湖北五峰种源遗传多样性水平最高，湖北五峰家系内的遗传多样性最丰富，存在较大的遗传分化。不同种源内家系之间的多样性指数及信息指数相差不多，说明在各自的生态环境中的变异水平相近。在厚朴良种选育过程中应充分重视优良种源、优良家系与优良单株的配合选择。
关键词AFLP；厚朴；群体；遗传多样性
中图分类号S567文献标识码A文章编号0517-6611（2016）27-0131-04
Abstract[Objective]The aim was to investigate the genetic diversity of Magnolia officinalisfrom different provenances，families and individuals， provide a theoretical basis for breeding. [Method]Amplified fragment length polymorphism（AFLP） was used to evaluate the genetic diversity of Magnolia officinalis from Hubei， Guangxi and Zhejiang among different provenances， families， individuals.[Result]The genetic distance between the 3 provenances was 0.048 2-0.128 4， and the similarity between Guangxi and Zhejiang was higher than Hubei. The average level of population genetic diversity， total population gene diversity， gene flow were 0.203 5， 0.254 1， 3.421 7. The average number of observed alleles and effective alleles were 1.658 3 and 1.341 4； Nei’s and Shannon diversity index were 0.203 5 and 0.308 7.The genetic diversity level of Hubei was the highest （0.225 8）， Zhejiang Jingning was the lowest （0.173 9）. The genetic diversity in families were 0.264 4， 0.181 9 and 0.173 8， Shannon diversity index was 0.415 4. [Conclusion]The genetic diversity of Hubei Wufeng was the highest， and so was the genetic diversity among individuals. The diversity index and information index among different provenances were close which indicate that the variation level of the different species in families was similar in the respective ecological environment. It should be payed full attention to the selection of superior provenances，families and superior individuals in the process of breeding of Magnolia officinalis.
Key wordsAFLP； Magnolia officinalis；Groups；Genetic diversity
厚朴为木兰科植物厚朴（Magnolia officinalis）或凹叶厚朴（Magnolia ficinalis var.biloba）的干燥干皮、枝皮和根皮[1]，是我国特有的珍贵传统中药材，始载于《神农本草经》，列为中品，历代本草均有收载，味苦辛，性温，具有温中理气、散满消胀、燥湿消积等功效。前者主要分布于四川、湖北等省，称为“川朴”，其叶型为小凸尖叶；后者主产于广西、福建等省，称为“温朴”，其叶型为凹叶。两者之间还有许多在叶形上呈中间状态的过渡类型。AFLP 分子标记技术具有分辨率高、稳定性好、效率高等优点[2-3]，在树木的种质资源鉴定、群体遗传多样性研究、亲缘关系研究等方面得到了广泛的应用[4-7]，在厚朴种质遗传多样性研究方面有较多应用[8]，分子标记辅助选择为育种工作提供了极大方便，可显著提高育种选择的效率与育种预见[9-10]。刘文生等[11]采用RAPD分子标记技术获得厚朴指纹图谱用于中药材厚朴及其伪品、混淆品等的鉴别。杨红兵等[12]采用ISSR分子标记技术对厚朴基因组DNA进行PCR扩增，构建了湖北恩施产厚朴的ISSR指纹图谱。余盛贤等[13]对厚朴与凹叶厚朴15个居群应用2个叶绿体基因间序列psbA-trnH和trnL-trnF进行PCR扩增及群体遗传学研究，得出厚朴与凹叶厚朴在遗传上已出现遗传分化的趋势，但尚未完全分化成彼此独立的单系。目前，利用AFLP分子标记研究厚朴种质资源群体层次变异规律的研究未见相关报道，为此，笔者运用AFLP分子标记探讨厚朴种源间、种源内家系及家系内个体间的多层次遗传多样性，以期为厚朴良种选育提供理论依据。 1材料与方法
1.1供试材料
于2014年9月下旬至10月上旬（厚朴种子成熟期），分别收集湖北省五峰县湾谭镇、广西省资源县铜座乡、浙江省景宁县外舍乡3个分别代表小尖叶型、中间型及凹叶型厚朴的半同胞家系种子，其中浙江景宁种源12个，其余为15个。种子去掉外种皮后湿沙混藏。次年初春，于前作为水稻的试验圃地育苗成苗，现采嫩叶用于分子试验。种源间、家系间AFLP分析的材料为每个家系随机选择5个样本做混合样，家系内单株间AFLP分析的材料随机选择H8、G8、Z12，每个家系随机抽取30株植株。
1.2方法
以建立及优化的厚朴AFLP分子标记体系为试验方法[14]，扩增条带的有无分别用1和0来表示，建立0/1基本数据矩。用NTSYS软件按平均数聚类法最后用UPGMA法进行聚类分析，构建系统树状图；应用POPGENE32软件，计算厚朴不同群体Nei’s基因多样性指数（h）、Shannon多样性指数（I）、种群内基因多样度（Hs）、总种群基因多样度（Ht）、遗传分化系数（Gst）以及基因流指数[Nm=0.5（1-Gst）/Gst]等。
2结果与分析
2.1厚朴种源间、家系间的分子遗传多样性从64个选择性扩增引物组合中筛选出多态性较明显、条带清晰的10个引物组合用于AFLP分析，共扩增出577个位点，平均每个引物组合扩增出57.7个位点，DNA片断大小分布在0.2～10 kb，其中178个位点具有多态性，约占总数的30.84%，每个引物检测到的多态性位点为17.8个（表2）。
根据种群遗传多样性平均水平Hs（0.203 5）和总种群基因多样度HT（0.254 1），计算种群间遗传变异在总遗传变异中所占比例，即Gst=1-Hs/HT =0.199 1，可知，种群间的遗传分化小于种群内家系间的遗传分化，即在总遗传变异中，有19.91%的遗传变异存在于种群间，80.09%的变异存在于种群内。种群间的基因流动较大，基因流Nm=3.421 7，结果表明种群间可能存在连续分布区域，群体间存在一定程度上的基因交流，如近些年由于厚朴人工林的营造，不同种质的引入在一定程度上也影响着当地种质的遗传变异。可见，基于AFLP分子标记的研究，属小凸尖型的湖北种源独自归类，中间型的浙江景宁种源与凹叶型的广西资源种源归一类。说明不同种源的厚朴具有一定的遗传稳定性，但也存在遗传分化，特定的遗传基础决定了相应的表型性状。
运用NTsys软件按类平均数聚类法（UPGMA）对湖北五峰（15个）、广西资源（15个）和浙江景宁（12个）的42个家系进行聚类，得到UPGMA系统树（图2）。其中16号、9号以及7号和19号家系相对于其他材料遗传距离较远，在遗传
基础方面有较大差异；而剩下的，在相似系数0.77处，可聚为2类，1号和6号归为一类后，其余形成一类。
对供试样品的原始矩阵进行主坐标分析，3个坐标的贡献值分别为18.24%、7.67%和6.26%，再对各样品分别做三维图排序，结果见图3。图3表明，1～13号比较紧凑地分布于最右侧，14～42号相对分散分布，但总体上还是按种源即16～30号、31～42号集合分布，除了14号、15号位于16～30号及31～42号群体中间，14号靠近广西资源群体（16～30号），15号接近浙江景宁群体（31～42号），而总体上来看，由左到右分别为广西与浙江，然后是湖北种源，基本与NTSYS获得的遗传聚类树相对应。湖北种源内家系间遗传多样性为h=0.225 8，Shannon信息指数I=0.348 3，说明湖北五峰种源内家系间的遗传多样性丰富，遗传多样性比较高；广西资源种源内家系间的遗传多样性为h=0.207 4，Shannon信息指数I=0317 0；浙江景宁种源内家系间遗传多样性为h=0.173 8，Shannon信息指数I=0.260 9，表明浙江景宁种源内遗传变异程度较低。
2.2家系内单株间的遗传差异
从64个选择性扩增引物组合中筛选出多态性较明显、条带清晰的12个引物组合用于AFLP分析，共扩增出608个位点，平均每个引物组合扩增出50.7个位点，DNA片断大小分布在0.2～1.0 kb，其中225个位点具有多态性，约占总数的37.00%，每个引物检测到的多态性位点为18.8个（表4）。
运用NTsys软件按类平均数聚类法对湖北资源H8家系、广西资源G8家系及浙江景宁Z12家系30个单株进行聚类分析，通过软件计算得到H8家系内遗传多样性为h=0264 4，Shannon信息指数I=0.415 4，说明湖北五峰种源家系内的遗传多样性丰富，遗传多样性比较高；广西资源种源家系内个体间的遗传多样性为h=0.181 9，Shannon信息指数I=0.317 0；浙江景宁种源内家系个体间遗传多样性为h=0.173 8，Shannon信息指数I=0.308 9，表明浙江景宁种源内遗传变异程度较低，湖北五峰遗传多样性水平最高，家系内都存在着较大的遗传分化，具有较丰富的遗传多样性。
3结论与讨论
生物群体遗传多样性的存在一定程度上代表了种群的适应策略，可以说某物种的多样性水平高，适应环境变化的能力就强。同时对厚朴种源间，种源内家系间及家系内个体间的遗传多样性分析表明，湖北五峰种源遗传多样性水平最高，在分子水平证实了质量好的种源厚朴遗传变异更为丰富，对某些类型的异质环境适应能力较强；不同种源内家系之间的多样性指数及信息指数相差不多，说明在各自的生态环境中的变异水平相近；湖北五峰家系内的遗传多样性最丰富，存在着较大的遗传分化。
形态特征上，一定程度上可以说浙江种源是类似于其他2个种源的中间类型，而浙江种源厚朴与广西种质相似性更高。试验采用主坐标分析和系统聚类分析所获得的结果基本一致，都体现出与形态分类上相一致的结果，且在聚类分析提供丰富的数量信息、清楚地体现不同种源厚朴差异的基础上，主坐标分析又从多个不同层面提供更多的关于不同群体之间关系的信息，更加直观地揭示种源间的差异及遗传变异，表明总体上遗传聚类与群体形态类型相符合，验证了遗传基础决定性状表型。厚朴种源间遗传多样性丰富，种源内个体间的遗传差异更大。在分子水平证实厚朴优良种源内优良单株的选择显得更加重要与迫切。因此，在厚朴良种选育过程中应充分重视优良种源、优良家系与优良单株的配合选择。 参考文献
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京：中国医药科技出版社，2010：176.
[2] ZABEAU M，VOS P. Selective restriction fragment：Amplification，amethod for DNA fingerprinting：European，94202629.7[P]1993.
[3] VOS P，HOGERS R，BLEEKER M，et al. AFLP：A new technique forDNA fingerprinting[J].Nucleic Acids Res，1995，23（21）：4407-4414.
[4] 黄佩蓓，陈世华，王飞.种木通属植物的AFLP 研究[J].中药材，2013，36（8）：1249-1252.
[5] 李佳，石琰璟，沙广利，等.41 份苹果属植物亲缘关系的AFLP 分析[J].果树学报，2013，30（5）：725-731.
[6] 王磊，解孝满，李文清，等.山东核桃主要分布区种质资源遗传多样性AFLP分析[J].西北林学院学报，2014，29（3）：113-118.
[7] 侯渝嘉，常亚丽，何桥，等.应用AFLP分子标记研究茶树品种新材料[J].西南农业学报，2015，28（2）：514-518.
[8] 翁剑，陈宝钢，李书平，等.厚朴分子标记技术应用现状及建议[J].湖北林业科技，2013，42（5）：45-48.
[9] LIU L，GUO W，ZHU X，et al.Inheritance and fine mapping of fertility restoration for cyloplasmic male sterility in Gossypium hirsutum L.[J].Theor Appl Genet，2003，106：461-469.
[10] 王泽立，王鲁昕，戴景瑞，等.运用近等基因系（NIL）、AFLP、RFLP和SCAR标记对玉米S组育性恢复基因（Rf3）的研究[J].遗传学报，2001，28（5）：465-470.
[11] 刘文生，朱建明，何斌，等.中药材厚朴的随机扩增多态性DNA指纹图谱研究[J].中药材，2004（3）：164-169.
[12] 杨红兵，崔光红，詹亚华，等.湖北恩施产厚朴ISSR指纹图谱构建[J].中药材，2009，32（1）：19-22.
[13] 余盛贤，袁庆军，杨滨，等.厚朴与凹叶厚朴群体遗传学研究[J].中国中药杂志，2010，35（16）：2129-2132.
[14] 蒋燕锋，斯金平，黄华宏，等.厚朴分子标记体系的建立[J].浙江林学院学报，2010，27（2）：304-309.
关键词AFLP；厚朴；群体；遗传多样性
中图分类号S567文献标识码A文章编号0517-6611（2016）27-0131-04
Abstract[Objective]The aim was to investigate the genetic diversity of Magnolia officinalisfrom different provenances，families and individuals， provide a theoretical basis for breeding. [Method]Amplified fragment length polymorphism（AFLP） was used to evaluate the genetic diversity of Magnolia officinalis from Hubei， Guangxi and Zhejiang among different provenances， families， individuals.[Result]The genetic distance between the 3 provenances was 0.048 2-0.128 4， and the similarity between Guangxi and Zhejiang was higher than Hubei. The average level of population genetic diversity， total population gene diversity， gene flow were 0.203 5， 0.254 1， 3.421 7. The average number of observed alleles and effective alleles were 1.658 3 and 1.341 4； Nei’s and Shannon diversity index were 0.203 5 and 0.308 7.The genetic diversity level of Hubei was the highest （0.225 8）， Zhejiang Jingning was the lowest （0.173 9）. The genetic diversity in families were 0.264 4， 0.181 9 and 0.173 8， Shannon diversity index was 0.415 4. [Conclusion]The genetic diversity of Hubei Wufeng was the highest， and so was the genetic diversity among individuals. The diversity index and information index among different provenances were close which indicate that the variation level of the different species in families was similar in the respective ecological environment. It should be payed full attention to the selection of superior provenances，families and superior individuals in the process of breeding of Magnolia officinalis.
Key wordsAFLP； Magnolia officinalis；Groups；Genetic diversity
厚朴为木兰科植物厚朴（Magnolia officinalis）或凹叶厚朴（Magnolia ficinalis var.biloba）的干燥干皮、枝皮和根皮[1]，是我国特有的珍贵传统中药材，始载于《神农本草经》，列为中品，历代本草均有收载，味苦辛，性温，具有温中理气、散满消胀、燥湿消积等功效。前者主要分布于四川、湖北等省，称为“川朴”，其叶型为小凸尖叶；后者主产于广西、福建等省，称为“温朴”，其叶型为凹叶。两者之间还有许多在叶形上呈中间状态的过渡类型。AFLP 分子标记技术具有分辨率高、稳定性好、效率高等优点[2-3]，在树木的种质资源鉴定、群体遗传多样性研究、亲缘关系研究等方面得到了广泛的应用[4-7]，在厚朴种质遗传多样性研究方面有较多应用[8]，分子标记辅助选择为育种工作提供了极大方便，可显著提高育种选择的效率与育种预见[9-10]。刘文生等[11]采用RAPD分子标记技术获得厚朴指纹图谱用于中药材厚朴及其伪品、混淆品等的鉴别。杨红兵等[12]采用ISSR分子标记技术对厚朴基因组DNA进行PCR扩增，构建了湖北恩施产厚朴的ISSR指纹图谱。余盛贤等[13]对厚朴与凹叶厚朴15个居群应用2个叶绿体基因间序列psbA-trnH和trnL-trnF进行PCR扩增及群体遗传学研究，得出厚朴与凹叶厚朴在遗传上已出现遗传分化的趋势，但尚未完全分化成彼此独立的单系。目前，利用AFLP分子标记研究厚朴种质资源群体层次变异规律的研究未见相关报道，为此，笔者运用AFLP分子标记探讨厚朴种源间、种源内家系及家系内个体间的多层次遗传多样性，以期为厚朴良种选育提供理论依据。 1材料与方法
1.1供试材料
于2014年9月下旬至10月上旬（厚朴种子成熟期），分别收集湖北省五峰县湾谭镇、广西省资源县铜座乡、浙江省景宁县外舍乡3个分别代表小尖叶型、中间型及凹叶型厚朴的半同胞家系种子，其中浙江景宁种源12个，其余为15个。种子去掉外种皮后湿沙混藏。次年初春，于前作为水稻的试验圃地育苗成苗，现采嫩叶用于分子试验。种源间、家系间AFLP分析的材料为每个家系随机选择5个样本做混合样，家系内单株间AFLP分析的材料随机选择H8、G8、Z12，每个家系随机抽取30株植株。
1.2方法
以建立及优化的厚朴AFLP分子标记体系为试验方法[14]，扩增条带的有无分别用1和0来表示，建立0/1基本数据矩。用NTSYS软件按平均数聚类法最后用UPGMA法进行聚类分析，构建系统树状图；应用POPGENE32软件，计算厚朴不同群体Nei’s基因多样性指数（h）、Shannon多样性指数（I）、种群内基因多样度（Hs）、总种群基因多样度（Ht）、遗传分化系数（Gst）以及基因流指数[Nm=0.5（1-Gst）/Gst]等。
2结果与分析
2.1厚朴种源间、家系间的分子遗传多样性从64个选择性扩增引物组合中筛选出多态性较明显、条带清晰的10个引物组合用于AFLP分析，共扩增出577个位点，平均每个引物组合扩增出57.7个位点，DNA片断大小分布在0.2～10 kb，其中178个位点具有多态性，约占总数的30.84%，每个引物检测到的多态性位点为17.8个（表2）。
根据种群遗传多样性平均水平Hs（0.203 5）和总种群基因多样度HT（0.254 1），计算种群间遗传变异在总遗传变异中所占比例，即Gst=1-Hs/HT =0.199 1，可知，种群间的遗传分化小于种群内家系间的遗传分化，即在总遗传变异中，有19.91%的遗传变异存在于种群间，80.09%的变异存在于种群内。种群间的基因流动较大，基因流Nm=3.421 7，结果表明种群间可能存在连续分布区域，群体间存在一定程度上的基因交流，如近些年由于厚朴人工林的营造，不同种质的引入在一定程度上也影响着当地种质的遗传变异。可见，基于AFLP分子标记的研究，属小凸尖型的湖北种源独自归类，中间型的浙江景宁种源与凹叶型的广西资源种源归一类。说明不同种源的厚朴具有一定的遗传稳定性，但也存在遗传分化，特定的遗传基础决定了相应的表型性状。
运用NTsys软件按类平均数聚类法（UPGMA）对湖北五峰（15个）、广西资源（15个）和浙江景宁（12个）的42个家系进行聚类，得到UPGMA系统树（图2）。其中16号、9号以及7号和19号家系相对于其他材料遗传距离较远，在遗传
基础方面有较大差异；而剩下的，在相似系数0.77处，可聚为2类，1号和6号归为一类后，其余形成一类。
对供试样品的原始矩阵进行主坐标分析，3个坐标的贡献值分别为18.24%、7.67%和6.26%，再对各样品分别做三维图排序，结果见图3。图3表明，1～13号比较紧凑地分布于最右侧，14～42号相对分散分布，但总体上还是按种源即16～30号、31～42号集合分布，除了14号、15号位于16～30号及31～42号群体中间，14号靠近广西资源群体（16～30号），15号接近浙江景宁群体（31～42号），而总体上来看，由左到右分别为广西与浙江，然后是湖北种源，基本与NTSYS获得的遗传聚类树相对应。湖北种源内家系间遗传多样性为h=0.225 8，Shannon信息指数I=0.348 3，说明湖北五峰种源内家系间的遗传多样性丰富，遗传多样性比较高；广西资源种源内家系间的遗传多样性为h=0.207 4，Shannon信息指数I=0317 0；浙江景宁种源内家系间遗传多样性为h=0.173 8，Shannon信息指数I=0.260 9，表明浙江景宁种源内遗传变异程度较低。
2.2家系内单株间的遗传差异
从64个选择性扩增引物组合中筛选出多态性较明显、条带清晰的12个引物组合用于AFLP分析，共扩增出608个位点，平均每个引物组合扩增出50.7个位点，DNA片断大小分布在0.2～1.0 kb，其中225个位点具有多态性，约占总数的37.00%，每个引物检测到的多态性位点为18.8个（表4）。
运用NTsys软件按类平均数聚类法对湖北资源H8家系、广西资源G8家系及浙江景宁Z12家系30个单株进行聚类分析，通过软件计算得到H8家系内遗传多样性为h=0264 4，Shannon信息指数I=0.415 4，说明湖北五峰种源家系内的遗传多样性丰富，遗传多样性比较高；广西资源种源家系内个体间的遗传多样性为h=0.181 9，Shannon信息指数I=0.317 0；浙江景宁种源内家系个体间遗传多样性为h=0.173 8，Shannon信息指数I=0.308 9，表明浙江景宁种源内遗传变异程度较低，湖北五峰遗传多样性水平最高，家系内都存在着较大的遗传分化，具有较丰富的遗传多样性。
3结论与讨论
生物群体遗传多样性的存在一定程度上代表了种群的适应策略，可以说某物种的多样性水平高，适应环境变化的能力就强。同时对厚朴种源间，种源内家系间及家系内个体间的遗传多样性分析表明，湖北五峰种源遗传多样性水平最高，在分子水平证实了质量好的种源厚朴遗传变异更为丰富，对某些类型的异质环境适应能力较强；不同种源内家系之间的多样性指数及信息指数相差不多，说明在各自的生态环境中的变异水平相近；湖北五峰家系内的遗传多样性最丰富，存在着较大的遗传分化。
形态特征上，一定程度上可以说浙江种源是类似于其他2个种源的中间类型，而浙江种源厚朴与广西种质相似性更高。试验采用主坐标分析和系统聚类分析所获得的结果基本一致，都体现出与形态分类上相一致的结果，且在聚类分析提供丰富的数量信息、清楚地体现不同种源厚朴差异的基础上，主坐标分析又从多个不同层面提供更多的关于不同群体之间关系的信息，更加直观地揭示种源间的差异及遗传变异，表明总体上遗传聚类与群体形态类型相符合，验证了遗传基础决定性状表型。厚朴种源间遗传多样性丰富，种源内个体间的遗传差异更大。在分子水平证实厚朴优良种源内优良单株的选择显得更加重要与迫切。因此，在厚朴良种选育过程中应充分重视优良种源、优良家系与优良单株的配合选择。 参考文献
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京：中国医药科技出版社，2010：176.
[2] ZABEAU M，VOS P. Selective restriction fragment：Amplification，amethod for DNA fingerprinting：European，94202629.7[P]1993.
[3] VOS P，HOGERS R，BLEEKER M，et al. AFLP：A new technique forDNA fingerprinting[J].Nucleic Acids Res，1995，23（21）：4407-4414.
[4] 黄佩蓓，陈世华，王飞.种木通属植物的AFLP 研究[J].中药材，2013，36（8）：1249-1252.
[5] 李佳，石琰璟，沙广利，等.41 份苹果属植物亲缘关系的AFLP 分析[J].果树学报，2013，30（5）：725-731.
[6] 王磊，解孝满，李文清，等.山东核桃主要分布区种质资源遗传多样性AFLP分析[J].西北林学院学报，2014，29（3）：113-118.
[7] 侯渝嘉，常亚丽，何桥，等.应用AFLP分子标记研究茶树品种新材料[J].西南农业学报，2015，28（2）：514-518.
[8] 翁剑，陈宝钢，李书平，等.厚朴分子标记技术应用现状及建议[J].湖北林业科技，2013，42（5）：45-48.
[9] LIU L，GUO W，ZHU X，et al.Inheritance and fine mapping of fertility restoration for cyloplasmic male sterility in Gossypium hirsutum L.[J].Theor Appl Genet，2003，106：461-469.
[10] 王泽立，王鲁昕，戴景瑞，等.运用近等基因系（NIL）、AFLP、RFLP和SCAR标记对玉米S组育性恢复基因（Rf3）的研究[J].遗传学报，2001，28（5）：465-470.
[11] 刘文生，朱建明，何斌，等.中药材厚朴的随机扩增多态性DNA指纹图谱研究[J].中药材，2004（3）：164-169.
[12] 杨红兵，崔光红，詹亚华，等.湖北恩施产厚朴ISSR指纹图谱构建[J].中药材，2009，32（1）：19-22.
[13] 余盛贤，袁庆军，杨滨，等.厚朴与凹叶厚朴群体遗传学研究[J].中国中药杂志，2010，35（16）：2129-2132.
[14] 蒋燕锋，斯金平，黄华宏，等.厚朴分子标记体系的建立[J].浙江林学院学报，2010，27（2）：304-309.