人骨唾液蛋白基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wyp345

【摘要】

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利用RT-PCR技术，从人骨膜组织总RNA中扩增长度为1kb的人骨唾液蛋白(bone sialoprotein，BSP)基因编码区序列，克隆至pBluescript Ⅱ，进行双链核苷酸序列测定，构建人BSP毕赤酵母表达

【作者】

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王捷董燕张宏斌武婕郑文岭

【机构】

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广州军区广州总医院医学实验中心,广州军区广州总医院医学实验中心

【出处】

：

中国生物化学与分子生物学报

【发表日期】

：

2004年3期

【关键词】

：

骨唾液糖蛋白分泌表达毕赤酵母 bone sialoglycoproteins secreted expression Pichia pastoris

【基金项目】

：

广东省自然科学基金研究团队资助项目 (No .2 0 0 2 3 0 0 1)L,,广东省医学科研基金项目 (No .A2 0 0 2 5 3 6)~~

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利用RT-PCR技术，从人骨膜组织总RNA中扩增长度为1kb的人骨唾液蛋白(bone sialoprotein，BSP)基因编码区序列，克隆至pBluescript Ⅱ，进行双链核苷酸序列测定，构建人BSP毕赤酵母表达质粒pPICZaA-hBSP并导入毕赤酵母Pichia pastoris GS115．SDS-PAGE和Westem印迹检测rhBSP的分泌表达，采用镍离子亲合层析纯化rhBSP并检测生物学活性，结果表明，克隆片段与基因库所登录的序列相一致，分泌表达的rhBSP-His融合蛋白分子量约为67

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