【摘 要】
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目的研究β-防御素-2基因沉默对B型流感嗜血杆菌结合疫苗免疫引起的大鼠炎性反应的影响。方法SPF级SD大鼠144只，分为单纯B型流感嗜血杆菌结合疫苗接种组(组1)、B型流感嗜血杆菌结合疫苗接种＋气管滴入慢病毒Lv-shRNA-rBD-2(组2)、气管滴入慢病毒Lv-shRNA-rBD-2(组3)、空白对照组(组4)，每组以免疫12、24和72 h为时间点，每组每个时间点12只。收集每组大鼠外周血分
【机 构】
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201318 上海国际医学中心重症监护室,上海杨浦区中心医院呼吸内科,同济大学附属东方医院呼吸内科,
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目的研究β-防御素-2基因沉默对B型流感嗜血杆菌结合疫苗免疫引起的大鼠炎性反应的影响。
方法SPF级SD大鼠144只，分为单纯B型流感嗜血杆菌结合疫苗接种组(组1)、B型流感嗜血杆菌结合疫苗接种＋气管滴入慢病毒Lv-shRNA-rBD-2(组2)、气管滴入慢病毒Lv-shRNA-rBD-2(组3)、空白对照组(组4)，每组以免疫12、24和72 h为时间点，每组每个时间点12只。收集每组大鼠外周血分离血清，ELISA检测TNF-α、IL-1β和IL-10含量。Western印迹检测大鼠肺组织β-防御素-2蛋白表达。组间比较使用t检验。
结果通过脂质体转染的方法，成功将病毒重组。在12、24、和72 h时间点，组1大鼠血清中炎性因子TNF-α含量分别为(82.0±8.0)、(155.0±18.2)和(272.0±32.5) pg/mL，分别为高于组4的(55.0±6.2)、(52.0±5.8)和(56.0±4.8) pg/mL，两组比较差异均有统计学意义(t值分别为16.034、12.411和10.530，P值分别为0.043、0.035和0.018)；而组2分别为(66.0±8.2)、(90.0±12.6)和(108.0±13.6) pg/mL，与组1比较差异均有统计学意义(t值分别为12.115、12.830和15.522，P值分别为0.039、0.033和0.012)。各时间点血清中IL-1β和IL-10含量组1高于组4，两组比较差异均有统计学意义(IL-1β，t值分别为18.032、15.824和13.518，P值分别为0.048、0.039和0.021；IL-10, t值分别为15.410、14.294和13.375，P值分别为0.045、0.032和0.013)；而组2低于组1，两组比较差异均有统计学意义(IL-1β，t值分别为19.012、16.991和14.862，P值分别为0.043、0.034和0.027；IL-10，t值分别为15.134、15.264和11.408，P值0.048、0.036和0.024)。疫苗免疫SD大鼠后72 h，大鼠肺组织中β-防御素-2蛋白相对表达量明显上升，组1高于组4，组2低于组1，组间比较差异均有统计学意义(t值分别为10.582和13.250，P值分别为0.035和0.027)。
结论β-防御素-2基因沉默可以改善B型流感嗜血杆菌结合疫苗免疫大鼠引起的炎性反应。
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