沉默FOXQ1基因对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖的影响

来源 :医学研究生学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aku168
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目的 FOXQ1基因在甲状腺乳头状癌(PTC)组织中呈现高表达,有关FOXQ1在PTC的生物学功能尚不清楚。文中旨在探讨FOXQ1-siRAN对PTC的TPC-1细胞增殖的影响及其可能的机制。方法通过lipofectamineTM2000将3条人工合成的FOXQ1-siRNA和NC-siRNA分别转入到PTC的TPC-1细胞,实验分为空白对照组(加入等量的磷酸盐缓冲液PBS)、NC-siRAN组(转染无意义序列siRNA)、FOXQ1-1组(空白培养基+lipofectamineTM2000+FOXQ1-1)、FOXQ1-2组(空白培养基+lipofectamineTM2000+FOXQ1-2)、FOXQ1-3组(空白培养基+lipofectamineTM2000+FOXQ1-3)。利用qRT-PCR和Western blot法分别检测FOXQ1 mRNA和蛋白的表达水平,MTT法观察细胞增殖活性的变化,qRT-PCR和Western blot分别检测细胞中细胞周期蛋白(cyclin D1)和c-Myc的表达水平。结果与空白对照组、NC-siRNA组FOXQ1 mRNA相对表达量比较,FOXQ1-3组明显抑制FOXQ1mRNA的表达(P<0.05)。FOXQ1-1组、FOXQ1-2组、FOXQ-3组的FOXQ1蛋白相对表达量(0.54±0.07、0.40±0.07、0.26±0.06)较NC-siRNA组(0.78±0.08)明显降低,FOXQ1-3组下降最为明显(P<0.05)。MTT结果显示,与空白对照组、NC-siRAN组比较,FOXQ1-3组可明显抑制TPC-1细胞的增殖活性(P<0.05)。FOXQ1-3组c-Myc、cyclin D1蛋白表达量(0.57±0.04、0.51±0.10)较空白对照组(1.05±0.07、0.94±0.12)、NC-siRNA组(0.92±0.06、0.91±0.11)明显降低(P<0.05)。结论沉默FOXQ1基因可以有效地抑制PTC的TPC-1细胞的增殖活性,这一作用可能通过抑制cyclin D1和c-Myc的表达水平来实现的。
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