目的采用荧光定量RT-PCR技术检测所制作的人地中海贫血茁654珠蛋白基因转基因小鼠模型mRNA的表达情况,评价该技术应用于小鼠mRNA分析的价值。方法根据GenBank小鼠mRNA序列,设计用于扩增小鼠mRNA的引物和反向探针,构建荧光定量RT-PCR技术。实验分两组,分别对转基因小鼠和正常小鼠中mRNA进行检测。采用SPSS统计软件,分析和比较两组动物中mRNA的表达量及表达的稳定性。结果所检测的11只转基因阳性小鼠中检测出人茁654珠蛋白基因mRNA和小鼠内源性mRNA;而在33只正常小鼠中只检测到小鼠内源性mRNA。荧光定量RT-PCR技术可检测到105拷贝数的人茁654珠蛋白基因mRNA和115拷贝数的小鼠内源性mRNA。荧光定量RT-PCR技术分别在F1代和F2转基因阳性小鼠中稳定地检测到,表明转基因小鼠mRNA获得稳定表达。结论所构建的荧光定量RT-PCR技术分析转基因小鼠mRNA表达具有检测定量、敏感、高效快捷的特点,该方法在鉴定和评估转基因小鼠mRNA的表达中稳定性好、定量准确,具有非常重要的应用价值。