【摘 要】
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目的:探讨银杏内酯B(GB)对癫痫(EP)模型大鼠脑组织的保护作用及其机制.方法:将120只雄性SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组、模型组、丙戊酸钠(VPA)组与GB低、中、高剂量组,每组20只.除空白对照组外,其余各组大鼠采用氯化锂-匹罗卡品诱导制备EP大鼠模型.注射匹罗卡品前30?min,空白对照组和模型组腹腔注射生理盐水,GB低、中、高剂量组分别腹腔注射2.5、5、10?mg/kg?GB,VPA组腹腔注射300?mg/kg?VPA.注射匹罗卡品后2?h内观察各组大鼠行为学变化,记录EP首次发作潜伏
【机 构】
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邯郸市第二医院,河北邯郸056000
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目的:探讨银杏内酯B(GB)对癫痫(EP)模型大鼠脑组织的保护作用及其机制.方法:将120只雄性SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组、模型组、丙戊酸钠(VPA)组与GB低、中、高剂量组,每组20只.除空白对照组外,其余各组大鼠采用氯化锂-匹罗卡品诱导制备EP大鼠模型.注射匹罗卡品前30?min,空白对照组和模型组腹腔注射生理盐水,GB低、中、高剂量组分别腹腔注射2.5、5、10?mg/kg?GB,VPA组腹腔注射300?mg/kg?VPA.注射匹罗卡品后2?h内观察各组大鼠行为学变化,记录EP首次发作潜伏期、发作持续时间,参照Racine分级标准对各组大鼠EP发作程度进行分级.注射匹罗卡品24?h后,各组随机取10只大鼠,脑组织固定切片,苏木精-伊红(HE)染色,观察大脑海马组织病理学改变;末端脱氧核苷酰基转移酶介导dUTP切口末端标记(TUNEL)法观察各组大鼠海马区神经元凋亡状况.各组剩余的10只大鼠,于注射匹罗卡品24?h后,取脑剥离海马,研磨匀浆,离心取上清液,黄嘌呤氧化法和钼酸铵法分别检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量,蛋白质免疫印迹(Western?blot)法检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、核因子-κB(NF-κB)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、激活型Caspase-3(Cleaved?Caspase-3)蛋白表达.结果:与模型组比较,GB中、高剂量组和VPA组大鼠EP发作潜伏期明显延长、发作持续时间明显缩短(P<0.01),EP发作程度明显降低(P<0.01);海马神经元病变和凋亡状况明显改善,凋亡指数降低(P<0.01);SOD、CAT活力升高且MDA含量降低(P<0.05或P<0.01);Nrf2、HO-1表达上调而NF-κB、Cleaved?Caspase-3表达下调(P<0.01),Cleaved?Caspase-3/Caspase-3比值降低(P<0.01).上述指标除CAT活力外,GB对其他指标的改善作用均表现出剂量依赖性;除CAT活力和Caspase-3表达外,高剂量GB对其他指标的影响均显著优于VPA(P<0.05或P<0.01).结论:GB对EP模型大鼠具有抗痫和脑组织保护作用,其机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路进而抑制氧化应激和细胞凋亡有关.
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