论文部分内容阅读
目的探讨3T3-L1脂肪细胞在营养剥夺状态下自噬的发生及自噬相关基因Beclin1的变化。方法培养3T3-L1脂肪细胞至不同诱导分化时期,对照组不做特别处理,营养剥夺组以Hanks液代替细胞完全培养液3 h,形成营养剥夺状态。采用透射电镜观察自噬体;转染携带微管相关蛋白1轻链3(LC3)的绿色荧光蛋白慢病毒(LC3-GFP-LENTIVIRAL)质粒系统,病毒扩增后感染3T3-L1靶细胞,荧光显微镜下观察LC3-GFP点状聚集;蛋白免疫印迹分析检测自噬抗体LC3以及Beclin1的变化;双荧光素酶报告基因